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目的：当把静脉血管移植到动脉后,静脉移植物在适应动脉环境的过程中,VEGF-A首先短暂地升高然后下降,但VEGF-A在静脉重塑中的作用尚不清楚。此外,尽管VEGF-A刺激血管生成(Angiogenesis)并在胚胎发育中决定内皮细胞朝动脉方向发展,但VEGF-A在调控成年静脉内皮细胞表现型方面的作用仍不清楚。因此,我们首先开展体外细胞实验,研究其在调节体外培养的成年静脉内皮细胞表现型中的作用。方法：以外源性血管内皮生长因子VEGF-A刺激体外培养的成年小鼠肺内皮细胞,以RT-PCR方法和免疫蛋白印记Western—Blot方法检测静脉标志物EphB4分子,以及动脉标志物EphrinB2、D114、Notch分子的表达；分别使用VEGFR2中和抗体,MEK/ERK抑制剂PD98059及Akt/PI3抑制剂Wortmannin预处理细胞,再以VEGF-A刺激细胞,RT-PCR方法检测EphB4、D114分子表达的变化。使用EphB4+/+野生型小鼠肺内皮细胞以及EphB4+/-基因敲除小鼠肺内皮细胞,以免疫沉淀和免疫荧光检测两组细胞EphB4磷酸化水平,RT-PCR方法和免疫蛋白印记Western—Blot方法分别检测VEGF-A, VEGFR2分子表达水平。外源性VEGF-A刺激两组细胞,比较两组细胞的EphB4, D114,EphrinB2基因表达水平,以及ERK1/2和VEGFR2蛋白磷酸化水平,和ERK1／2和VEGFR2基因表达水平。结果：VEGF-A在mRNA水平及蛋白水平均下调成年小鼠肺内皮细胞静脉标志物EphB4分子的表达,并上调动脉标志物D114分子的表达,但不上调动脉标志物Notch、EphrinB2的表达。使用VEGFR2中和抗体抑制了VEGF-A介导的EphB4分子下调,但没有抑制D114分子上调。使用PD98059对EphB4分子下调和D114分子上调都有抑制作用；使用Wortmannin预处理细胞,对EphB4分子下调和D114分子上调没有明显作用。VEGF-A对EphB4的抑制,通过VEGFR2及其下游传导通路ERK1/2发挥效应；VEGF-A依靠ERK1/2通路上调D114的表达,但不依靠VEGFR2发挥作用。与EphB4+/+野生型细胞相比,EphB4+/-基因敲除细胞的EphB4磷酸化水平下降,其表达VEGF-A, VEGFR2水平上升。在EphB4+/-基因敲除内皮细胞中,VEGF下调EphB4分子表达量较EphB4+/+野生型内皮细胞更多,VEGF上调D114分子表达量较野生型内皮细胞亦更多。EphB4对VEGF信号的负反馈调节可能通过ERK1/2信号发挥作用。结论：尽管内皮细胞朝静脉或者动脉方向的发展是由基因编码的,但VEGF-A能抑制成年静脉内皮细胞静脉表现型的表达,却不诱导其动脉表现型的表达。该体外实验结果与体内静脉移植物适应动脉环境所发生的变化一致。静脉移植物适应动脉环境可能依靠内皮细胞的可塑性以及它们整合VEGF信号通路的能力来调节血管表现型。EphB4不只是一个静脉标志物,它能通过抑制成年静脉内皮细胞的VEGF-A信号,促进其静脉表现型的保留。