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隐孢子虫病和贾第虫病是重要的人兽共患机会性致病原虫病,世界范围内广泛流行。隐孢子虫可感染包括人在内的至少260种脊椎动物,主要引起人和动物腹泻,免疫缺陷和免疫力低下者感染后可出现明显临床症状,严重者导致死亡。贾第虫呈全球性分布,是常见的致腹泻病原,曾在国际旅行者中流行,故被称为“旅行者腹泻”,为全世界危害人类健康的10种主要寄生虫病之一。隐孢子虫和贾第虫均可通过多种途径进行传播和感染,通常认为被卵囊或包囊污染的食物和水是主要的传染源,伴侣动物易携带并传播该两种病原,对人类健康是潜在的威胁。基于分子生物学研究,犬可感染C. canis、C. parvum、C. muris和C. meleagridis,均为重要的人兽共患隐孢子虫虫种。大量研究表明,犬为贾第虫易感动物,可携带人兽共患贾第虫集聚体,同一家庭人与犬之间贾第虫感染率具正相关性。随着社会经济发展,人与伴侣动物直接或间接接触机会越来越多,人兽共患病原对人类健康是潜在威胁。为了解犬隐孢子虫和贾第虫感染情况,评价其公共卫生意义,本研究对四川部分地区犬肠道寄生虫感染情况进行调查,并采用分子生物学方法对其隐孢子虫和贾第虫虫种和基因进行鉴定和分析。1.采用福尔马林-乙酸乙酯离心沉淀法、卢戈氏碘液染色法和饱和蔗糖溶液漂浮法对四川成都市、简阳市和雅安市3个犬场、2所动物医院、1个流浪犬收养所和1个实验动物房共计494份新鲜粪便样品进行检查,发现212份样品呈阳性,寄生虫总感染率为42.9%,其中犬球虫感染率最高,达26.9%,犬隐孢子虫、贾第虫、蛔虫、吸虫、类圆线虫、钩虫、鞭虫和绦虫感染率分别为4.3%,23.5%,9.7%,1.8%,8.9%,6.3%,0.4%和6.5%。本次调查为宠物犬和流浪犬肠道寄生虫病防控提供了参考依据。2.基于18S rRNA基因位点对19个犬隐孢子虫分离株进行扩增,获得长度均为830bp左右的目的片段,采用SspI和VspI酶对其进行限制性片段多态性PCR(RLFP-PCR)分析,选取4个分离株进行测序,利用Clustal X1.81、phylip 3.67和DNAstar4.0等生物学软件进行序列比对、构造进化树及同源性分析。酶切结果显示19个分离株均为C. canis,序列分析结果显示4个分离株与GenBank上下载的C. canis的同源性均为100%。3.基于TPI基因位点对86个犬贾第虫分离株进行扩增,得到长530bp的目的片段。选取12个分离株进行测序,序列比对结果显示本次分离的贾第虫虫株为集聚体C。4.本研究对四川省部分地区犬隐孢子虫和贾第虫感染情况进行了调查,并运用分子生物学方法对其分子遗传特征进行分析,鉴定出隐孢子虫虫种和贾第虫基因型,其中隐孢子虫为人兽共患虫种,贾第虫为犬独有的基因型,表明犬对人类健康存在潜在威胁,应加强犬类人兽共患病原的防控。本研究初步掌握了四川省部分地区犬隐孢子虫和贾第虫的流行动态和分子遗传特征,为今后深入的调查研究奠定了基础。