镰形扇头蜱唾液腺及其表达序列标签的研究

来源 :广西大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ffanhaixin
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
镰形扇头蜱可传播牛的巴贝斯虫病等,是我国南方的优势蜱种。其唾液腺是重要器官,在吸血过程中分泌大量的功能分子,这些功能分子成为最有价值的候选疫苗抗原分子。本文通过对镰形扇头蜱唾液腺及其表达序列标签(EST)研究,旨在寻找抗蜱及蜱传病疫苗的抗原候选分子。 本研究选择温度为25℃、相对湿度为92%的条件进行镰形扇头蜱兔体的人工饲养和繁殖,获得单雌蜱克隆蜱群。解剖镰形扇头蜱,取其唾液腺,经液氮反复冻融、超声、离心获得唾液腺提取物(SGE)。将含量为10μg的镰形扇头蜱未吸血和半饱血SGE进行SDS-PAGE,发现二者蛋白表达存在明显差异,主蛋白条带分别为69kDa、100kDa,吸血后蛋白表达发生变化,在分子量为45-100kDa间产生一些新的蛋白分子。将蛋白抗原转印到PVDF膜,用被镰形扇头蜱三次叮咬的兔抗血清进行Western-blotting分析,发现35kDa的蛋白可能是较重要的抗原,100kDa蛋白是蜱吸血时产生的新抗原。用半饱血SGE抗原经间接ELISA法检测人工感染的镰形扇头蜱幼虫、若虫、成虫的免抗蜱唾液抗体的变化情况,发现被蜱叮咬的兔抗体效价随着叮咬次数的增加而增加。通过Smart方法结合长链PCR(LD-PCR)构建了高质量的镰形扇头蜱半饱血唾液腺cDNA广西大学硕士论文镰形扇头蝉唾液腺及其表达序列标签的研究文库,文库重组率为95.2%,插入片段多在0.5一Zkb之间,库容量为2、75X106pfu/mL,为分离有价值的基因提供了资源及平台。经大肠杆菌BM25.8质粒化,从eDNA文库获得1 00条平均长度为745bp的有效ESTs,经功能分析发现,分别与能量代谢、信号传导、蛋白合成等基因相关,Es丁s中有27%的未知新基因,2条分别为ATP酶、细胞色素氧化酶m蛋白的全长基因,并登录在Ge心ankTM上,登录号分别为AY319968、AY422796;同时在ESTs中还发现一些抑制分子、粘合素蛋白等有价值的ESTs。 通过研究,发现了镰形扇头蜂唾液腺的重要蛋白抗原;构建了国内第一个镰形扇头蟀唾液腺cDNA文库,并运用EST技术获得了新基因,为蟀的相关研究提供了平台,为控制蟀及蟀传病奠定了基础。
其他文献
贵州小檗属药用植物产(藏)量及生境调查张天伦,何顺志,黄勇其,徐文芬(贵州省中药研究所贵阳550002)小檗属BerberisL.(以下简称三颗针)药用植物,民间使用较广泛,也是制药工业提制小劈碱的主要原料。该属植
本文给出的新的跳汰流程用水制度将会使所有设有浮选的选煤厂能采用直接浮选工艺。新的用水制度可节能30%,澄清面积减少50%。这不仅给直接浮选,同时也给分级跳汰流程的推广应用
随着我国国家经济的飞速发展,音乐艺术的发展也展现着蓬勃生机.越来越多人听到了民乐之声,民乐与西洋乐的比较好像也从未停息过.有些人总觉得西洋乐更“高级”,而民族乐器有
在新的形势下,政治工作者的思想教育是一个国家素质的缩影,政治思想教育工作是主要是对人即行政单位员工思想政治领域和精神领域的教育和学习,思想政治教育工作开展好可以促
维汉蒂矿每年生产110多万t矿石,可得到7.3万t锌精矿、1.2万t铜精矿和0.4万t铅精矿。尽管矿石品位下降,但通过强有力的机械化,通过使用分段空场法技术,使产量提高,保证了连续
用活性炭固载硅钨酸催化剂催化合成了丁酸丁酯。探讨了反应时间、酸醇比、催化剂吸附量等因素对反应的影响 ;并考察了催化剂的重复使用性能。实验表明 ,这种固载催化剂催化活
期刊
微课作为一种新型教学模式,主要载体是视频,在小学教育教学中应用极为广泛.微课具备内容新颖、短小精悍及针对性强等优势,在小学语文教学中的合理应用,可以确保所有学生学习
随着国家的发展,人们的生活水平逐渐提高,对于水杯功能的要求也有所增加,基于此,本文针对新型快速降温水杯进行分析,以期利用降温功能满足人们的产品需求.
本文主要是在新世纪中国对外文化交流和经济合作日渐增强的背景下探讨商务英语口语教学的模式;课堂上运用全英教学法及任务型教学法相结合的模式能提高课堂的效率,从而有效提