丙烯酰胺对斑马鱼部分器官酶活性影响和DNA损伤的研究

来源 :哈尔滨商业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zyr2007
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在我国的石油开采过程中,通常要使用大量的开采絮凝剂聚丙烯酰胺,并且使用量逐年增大。近来,有研究发现聚丙烯酰胺在自然环境中会发生缓慢降解并生成产物丙烯酰胺(AM)以及其他低聚物。生活中,除了石油开采,还有很多AM通过其他途径被排放到环境中,比如工业生产、食品加工等。AM是一种有毒物质,具有神经、遗传和生殖发育等毒性。但是,我国对于AM的排放并没有明确的标准,在环境中存在的AM将直接影响着其周围的生物和环境,因此,对AM进行生态毒理学研究十分有必要。乙酰胆碱酯酶(AchE)在神经系统中含量较高,而且它可以作为良好的生物学标记物来研究毒物对神经系统的损害。抗氧化酶过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)普遍存在于生物体的各个器官,它们可以通过氧化还原作用将体内的过氧化物转化为无毒或者毒性较低的物质,抑制氧自由基的生成,保持体内代谢的平衡。细胞DNA受损后,DNA结构遭到破坏,细胞会出现DNA碎片,在单细胞凝胶电泳(SCGE)过程中,受损的DNA碎片会形成拖尾,呈现彗星状。本实验采用化学比色法就AM对斑马鱼脑、腮、肝及生殖腺中抗氧化酶CAT、SOD和GSH-Px酶活性的影响进行了研究,并就AM对斑马鱼脑组织中AchE活性的影响进行了探讨,通过SCGE法分别对斑马鱼脑细胞和腮细胞中DNA损伤情况进行了研究。实验结果显示:AchE活性的研究实验中,AM低剂量组、中剂量组及高剂量组的AchE活性同空白组相比均显著降低(P<0.01),且随着AM剂量的增大AchE活性也逐渐下降。脑组织CAT、SOD和GSH-Px酶活性的研究实验中,同空白组相比,AM低剂量组、中剂量组及高剂量组的SOD、CAT及GSH-Px酶活性均显著降低(P<0.01),且随着AM剂量的增加,各组CAT、SOD及GSH-Px酶活性也随之降低;腮组织CAT、SOD和GSH-Px酶活性的研究实验中,同空白组相比,AM低剂量组、中剂量组及高剂量组的CAT、SOD及GSH-Px酶活性均显著降低(P<0.01);肝组织CAT、SOD和GSH-Px酶活性的研究实验中,同空白组相比,AM低剂量组SOD活性降低(P<0.05),AM中剂量组及高剂量组的SOD活性同空白组相比显著降低(P<0.01),而AM低剂量组、中剂量组及高剂量组的CAT与GSH-Px酶活性均显著降低(P<0.01);在生殖腺CAT、SOD和GSH-Px酶活性的研究实验中,同空白组比较三种酶活性均显著降低(P<0.01),且随着AM剂量的增加,各组抗氧化酶活性随之降低。脑细胞SCGE的实验结果显示,空白组脑细胞呈圆形,无彗星状细胞出现;低剂量组细胞出现微弱的彗星状,但是彗星拖尾现象不明显;中剂量组有彗星状细胞出现,拖尾较明显;高剂量组有明显彗星状细胞出现,并且彗星拖尾明显。经统计得空白组、低剂量组、中剂量组和高剂量组彗星出现率分别为6%、18%、32%和46%。同空白组相比,AM低剂量组、中剂量组及高剂量组的彗星尾长和尾部DNA含量均显著升高(P<0.01),且随着AM剂量的增加,各组尾长和尾部DNA含量也随之升高。各组尾矩中,同空白相比,AM中剂量组和高剂量组均显著升高(P<0.01),而低剂量组升高没有显著效果(P>0.05);腮细胞SCGE的实验结果显示,空白组腮细胞呈圆形,无彗星状细胞出现;低剂量组细胞形状也呈现圆形状,无明显彗星状细胞出现;中剂量组细胞有一定程度上的破裂,且有彗星状细胞出现,但拖尾不明显;高剂量组细胞有彗星状DNA出现,彗星状细胞的拖尾很明显。经统计得空白组、低剂量组、中剂量组和高剂量组彗星出现率分别为4%、8%、14%和20%。同空白组相比,AM低剂量组、中剂量组及高剂量组的彗星尾长和尾矩均显著升高(P<0.01),且随着AM剂量的增加,各组尾长和尾矩也随之升高。各组尾部DNA含量中,同空白相比,AM中剂量组和高剂量组均显著升高(P<0.01),而低剂量组升高没有显著效果(P>0.05)。结论:AM有降低斑马鱼脑组织AchE活性的作用,并且AM浓度越大AchE活性越低;AM对斑马鱼脑、腮、肝以及生殖腺中抗氧化酶CAT、SOD和GSH-Px活性有抑制作用,三个酶的活性随着AM剂量的增加而降低;当AM剂量高于2.04mg/L时,会损坏斑马鱼脑细胞和腮细胞中的DNA并产生DNA碎片,从而对DNA造成损伤,并且随着AM剂量的增加,损伤表现的越明显。
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