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目的: 研究黄芩、柴胡及其配伍提取物体外抗CVB3m病毒及对细胞活性影响,探讨不同药物的作用机制和靶点;研究黄芩、柴胡及其配伍提取物对CVB3m诱导Balb/c小鼠心肌炎的治疗作用,并初步探讨其作用机制。 方法: 1.采用微量细胞培养法,以细胞病变法和MTT法判定细胞活性,观察黄芩、柴胡及其配伍提取物以及黄芩两种不同提取制剂体外抗CVB3m病毒和对细胞活性的影响,确定黄芩、柴胡及其配伍提取物以及黄芩两种不同提取制剂抑制病毒指数和药物对细胞的预防和治疗保护率。 2.采用腹腔注射CVB3m病毒诱导Balb/c小鼠心肌炎,应用RT-PCR技术检测病原核酸,结合光镜和电镜病理观察方法,鉴定小鼠病毒性心肌炎模型。 3.将黄芩、柴胡及其配伍的提取物以灌胃给药途径治疗CVB3m心肌炎小鼠14天,观察三组药物对小鼠一般状态、体重、14天存活率、心脏质量/体质量、心脏组织CVB3m病毒滴度及光镜和电镜病理改变的影响。 4.采用RT-PCR技术,检测各组小鼠给药后不同时间（3天、5天、7、10天、14天）心肌组织中CVB3m—RNA的复制和IFN-mRNA的表达情况,探讨黄芩、柴胡及其配伍提取物干预病毒复制和诱生干扰素的作用。 5.分别采用TUNEL、免疫组化和RT-PCR技术,检测小鼠给药后不同时间点心肌组织细胞凋亡情况、Bcl-2和Bax的蛋白及mRNA表达情况,探讨黄芩、柴胡及其配伍提取物对病毒性心肌炎心肌组织细胞凋亡的干预。 结果: 一、体外实验 1.黄芩提取物浓度为1.563mg/ml时,抑制病毒指数大于2,而柴胡组和配伍组的抑病毒指数均小于2;三组药物都具有不同程度的预防保护作用,而柴胡组和配伍组的预防保护作用尤为明显,其预防保护率明显高于黄芩组,有显著性差异（P<0.05）;在病毒感染后,三