【摘 要】
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为深入了解与衰老相关的蛋白酶在叶片组织中的生理功能和采取有效措施控制蛋白酶在衰老过程中的作用,该研究以离体香菜为试材,对香菜叶片中衰老相关蛋白酶的特性进行了研究分
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为深入了解与衰老相关的蛋白酶在叶片组织中的生理功能和采取有效措施控制蛋白酶在衰老过程中的作用,该研究以离体香菜为试材,对香菜叶片中衰老相关蛋白酶的特性进行了研究分析,并对其进行了初步的分离纯化;同时分析了赤霉素和乙烯对香菜叶片衰老的影响.采用改进的Gelatin-SDS-PAGE方法,从香菜叶片中鉴定出一种衰老相关蛋白酶(senescence related protease,SRP),其活性上升与叶片衰老进程一致.GA<,3>处理香菜抑制了这种蛋白酶的活性,乙烯处理则使该蛋白酶活性上升.这个SRP分子量约为63kDa,其活性受PMSF(丝氨酸蛋白酶抑制剂)所抑制,表明该SRP属于丝氨酸类型的蛋白酶.该蛋白酶在50℃条件下,在pH6-9的范围内酶反应活性最强.但在70℃下,pH为5或11的条件下该蛋白酶仍保持一定的活性.结合硫酸铵分级沉淀和SDS-PAGE电泳分离方法初步提纯了香菜中的SRP.
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