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泛素化作为一种翻译后的编辑，是泛素与靶蛋白特异性结合的过程。泛素标记需要被降解的蛋白受泛素激活酶E1激活，受泛素化的靶蛋白被泛素蛋白酶体系统（UPS）识别并降解。泛素羧基末端水解酶3（UCH-L3）是去泛素化酶家族（DUBs）的成员之一，在泛素和泛素底物蛋白水解的过程中发挥重要作用。UCH-L3有羧基末端水解酶活性，能作用于泛素的羧基端将泛素上结合的小分子的肽和化合物水解为泛素单体和结合物。UCH-L3通过形成Lsy48-和Lsy63-结合泛素二聚体来防止靶蛋白的降解和抑制泛素化活性。 目的：探究UCH-L3在体外对人乳腺癌细胞系MCF-7和人乳腺癌三阴乳腺癌细胞系MDA-MB-231生物学行为的影响及调节机制。研究在体外VASH1对人乳腺癌三阴乳腺癌细胞系MDA-MB-231和人乳腺癌细胞系MCF-7增殖的影响。 方法：构建人乳腺癌三阴乳腺癌细胞系MDA-MB-231和人乳腺癌细胞系MCF-7细胞UCH-L3过表达稳定株，采用蛋白印迹（Western blot）技术检测人乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞和MCF-7细胞对照组以及UCH-L3过表达组VASH1和UCH-L3的蛋白表达水平情况；应用划痕实验检测人乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞对照组及UCH-L3过表达组细胞迁移能力；采用Transwell实验检测人乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞和MCF-7细胞对照组以及UCH-L3过表达组细胞侵袭能力；应用克隆形成实验检测人乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞和MCF-7细胞对照组以及UCH-L3过表达组细胞成瘤能力。构建人乳腺癌三阴乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞VASH1过表达和阴性对照稳定株，采用Western blot技术检测人乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞阴性对照组以及VASH1过表达组VASH1的蛋白表达水平情况。应用CCK-8实验检测外源性VASH1蛋白对人乳腺癌三阴乳腺癌细胞系MDA-MB-231和人乳腺癌细胞系MCF-7增殖能力及人乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞阴性对照组以及VASH1过表达组细胞增殖能力。 结果：与正常组相比，MDA-MB-231细胞UCH-L3过表达组的UCH-L3蛋白表达明显升高，差异有统计学意义（P＜0.05），细胞的迁移、侵袭和成瘤能力明显降低，差异有统计学意义（P＜0.05）。与正常组相比，MCF-7细胞UCH-L3过表达组的UCH-L3蛋白表达明显升高，差异有统计学意义（P＜0.05），过表达组细胞侵袭和克隆形成能力明显增加，差异有统计学意义（P＜0.05）。MDA-MB-231细胞和MCF-7细胞的正常组和UCH-L3过表达组的VASH1蛋白均不表达。与阴性对照组相比，MDA-MB-231细胞VASH1过表达组的VASH1蛋白水平明显升高，差异有统计学意义（P＜0.05）；阴性组与过表达组细胞的增殖无差异。外源性加入VASH1蛋白的培养基组，MDA-MB-231细胞和MCF7细胞的增殖均降低，差异均有统计学意义（P＜0.05）。 结论：UCH-L3抑制MDA-MB-231细胞的侵袭转移和克隆形成能力；UCH-L3促进MCF7细胞的侵袭和克隆形成能力；UCH-L3影响MDA-MB-231细胞和MCF-7细胞的生物学行为机制可能与HIF-1α相关；外源性VASH1蛋白抑制MDA-MB-231细胞和MCF-7细胞的增殖；内源性VASH1基因对MDA-MB-231细胞的增殖无明显影响。