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目的：
胸水是肺部疾病或肺癌的常见并发体症，也是查找病因，鉴别其良恶性的重要媒介。本课题以免疫化学SP法在细胞水平上检测GLUT1表达差异，同时采用双标准曲线法Real-time RT-PCR定量检测肺癌患者胸水中GLUT1mRNA含量，其意为癌细胞在脱落胸腔内早期阶段、甚至尚未脱落至胸腔而建立国内肺癌早期诊断方法。
方法：
研究用150例标本来自2011年3月至2012年2月湖南省人民医院及湖南省肿瘤医院患者胸水细胞。病例标本分为对照组和肺部疾病患者组，后者又分为肺部炎症、良性肿瘤和肺癌组。其检测标本离体后经2500r/min离心10min后分为两部分：一部分将沉淀细胞制成石蜡切片用于HE常规染色和SP免疫组织化学染色技术检测胸水细胞中的GLUT1蛋白表达；另一剩余的沉淀细胞置-70℃冰箱保存，采用双标准曲线法Real-time RT-PCR技术对GLUT1 mRNA进行定量检测。
结果：
1)GLUT1蛋白在对照组、肺良性病变组和肺癌组三组中的总体表达有差异(Hc=45.197，P<0.05)。两两比较显示：对照组和肺良性病变组两组间比较，GLUT1表达差异无统计学意义(x2=1.893，P>0.05)；GLUT1在肺癌组表达明显高于对照组和肺良性病变组(x2=6.090，4.817，均P<0.001)。
2)GLUT1蛋白在肺癌70例中，其中Ⅲ-Ⅳ期中的表达强度高于I-Ⅱ期、低-中分化组高于高分化组、有淋巴结转移组高于无淋巴结转移组(均P<0.05)。
3)Real-time RT-PCR双标准曲线法检测GLUT1 mRNA归一化值分别为：对照组：0.0014+0.0199、肺良性病组：0.0119+0.0240、肺癌组：0.3889±0.4598。GLUT1mRNA在对照组、肺良性病变组和肺癌组三组中的表达总体差异非常显著(Hc=69.848，P<0.01)。两两比较显示：GLUT1 mRNA在肺癌组表达明显高于对照组和肺良性病变组(x2=7.559，6.008均P<0.001)；但对照组和肺良性病变组GLUT1 mRNA表达无统计学意义(x2=2.325，P>0.05)。
4)GLUT1 mRNA在不同类型疾病组间比较：肺癌Ⅲ-Ⅳ期中的表达强度高于I-Ⅱ期、低-中分化组高于高分化组、存在淋巴结转移组高于无淋巴结转移组(均P<0.05)。
5)ROC曲线结果显示：在ROC曲线确定诊断阈值为0.0056的条件下，计算RT-PCR的GLUT1 mRNA与SP免疫组化检测GLUT1下面积，分别为0.880和0.791，显示GLUT1 mRNA诊断价值优于SP法GLUT1检测。
结论：
1)胸水中GLUT1与肺癌的发生发展有关，对肺癌临床鉴别诊断及预后有临床参考价值。
2)建立了双标准曲线法Real-time PCR检测胸水中GLUT1mRNA的方法，可作为早期检测肺癌的新方法。
3)GLUT1 mRNA对肺癌早期诊断有较好的特异性和灵敏度。