【摘 要】
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化学农药的大量使用会产生严重的农药残留和抗药性问题,利用植物提取物开发高效的环境友好型生物农药,在大幅度降低农药残留的同时,还会实现对小菜蛾的有效防治。基于此,本研究以飞燕草种子为材料,探究其不同溶剂提取物对小菜蛾生物活性,并从生理生化水平和分子水平研究杀虫活性最高的乙酸乙酯提取物对小菜蛾体内多种酶活性和解毒酶相关基因的影响,最后鉴定并确定了该提取物中含量较高的亚油酸乙酯具有最优的小菜蛾幼虫杀虫活
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化学农药的大量使用会产生严重的农药残留和抗药性问题,利用植物提取物开发高效的环境友好型生物农药,在大幅度降低农药残留的同时,还会实现对小菜蛾的有效防治。基于此,本研究以飞燕草种子为材料,探究其不同溶剂提取物对小菜蛾生物活性,并从生理生化水平和分子水平研究杀虫活性最高的乙酸乙酯提取物对小菜蛾体内多种酶活性和解毒酶相关基因的影响,最后鉴定并确定了该提取物中含量较高的亚油酸乙酯具有最优的小菜蛾幼虫杀虫活性。主要研究结果如下:1.飞燕草不同溶剂提取物对小菜蛾的生物活性测定测定飞燕草不同溶剂提取物对小菜蛾幼虫触杀、胃毒、选择性拒食、生长发育抑制和成虫产卵驱避性的影响。结果显示:在触杀作用中,飞燕草乙酸乙酯提取物具有较高的触杀活性,处理小菜蛾幼虫72 h后的LC50为5.05 mg/m L;在胃毒作用中,飞燕草乙酸乙酯提取物在最高浓度50 mg/m L时,处理小菜蛾72 h后的校正死亡率为67.39%,其次为石油醚提取物,最高浓度处理72 h后的校正死亡率为57.36%;在选择性拒食作用中,最高浓度50 mg/m L处理小菜蛾24 h、48 h和72 h后,乙酸乙酯提取物拒食率均大于90%,其次为正丁醇提取物,最高浓度处理72 h后选择性拒食率为71.79%;在生长发育抑制作用中,乙酸乙酯提取物生长发育抑制效果最佳,在最高浓度50 mg/m L饲喂小菜蛾幼虫3 d后,生长抑制率为66.38%;在成虫产卵驱避性的影响中,最高浓度50 mg/m L处理72 h后,甲醇、乙醇、正丁醇、乙酸乙酯和石油醚提取物对小菜蛾成虫选择性产卵驱避率分别为23.59%、31.67%、50.36%、67.85%和33.51%。2.飞燕草乙酸乙酯提取物对小菜蛾幼虫体内酶活性的影响设置亚致死浓度下的浓度梯度和致死中浓度LC50水平下的时间梯度两种参数,探究其对小菜蛾体内多种酶活性的影响。结果表明,不同浓度和不同时间均会影响小菜蛾体内酶活性,在所有亚致死浓度下处理24 h后,小菜蛾幼虫体内ACh E、Car E、GST活性均被抑制,CAT活性被诱导激活;在同一致死中浓度LC50处理后,随着时间的增加,ACh E、Car E、GST和POD、SOD活性均有不同程度的上升,但总体上仍显著低于对照组,而CAT活性被激活后在各时间段均高于对照组。3.飞燕草乙酸乙酯提取物对小菜蛾解毒酶相关基因表达的影响利用荧光定量PCR技术分析经飞燕草乙酸乙酯处理后小菜蛾解毒酶相关基因的表达量,结果显示Px GSTD2、Px GSTD4、Px GSTD5、Px GSTE2和Px GSTE4在整个时间段都有所上调,Pxae28和Px GSTE3在所有时间段下调。4.气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)分析飞燕草乙酸乙酯提取物的有效成分及杀虫成分初筛通过GC-MS对飞燕草乙酸乙酯提取物进行成分分析,检测结果显示其含有酯类、酰胺类和烷烃类等24种化学成分;选用含量较高的反-9-十八碳烯酸甲酯、棕榈酸甲酯、亚油酸乙酯和芥酸酰胺4种成分对小菜蛾幼虫进行杀虫活性测定,结果表明72 h后,4种成分在对小菜蛾的LC50分别为0.60 mg/m L、6.13 mg/m L、0.26mg/m L和2.03 mg/m L。综上所述,本文的研究结果为后续揭示飞燕草提取物的作用机制提供参考,同时也为小菜蛾的防治和植物源生物农药的开发提供借鉴作用。
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