叶瓜参多糖成分结构和生物活性的初步研究

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叶瓜参(Cucumaria frondosa Gunnerus)属棘皮动物门(Echinodermata)、海参纲(Holothurcidea)、楯手目(Dendrochirotida)、瓜参科(Cucumariidae)的海洋动物。本课题对加拿大海域的叶瓜参(C. frondosa Gunnerus)中的多糖成分进行了一定的化学和生物活性研究。采取水提醇沉法进行提取,Sevage法去除蛋白,双氧水法脱色制备得叶瓜参粗多糖。从原料叶瓜参冻干粉中提取叶瓜参粗多糖得率均值为9.35%。应用超滤装置,Sephadex G-25柱层析,Sephadex G-100柱层析,高效凝胶过滤色谱(HPGFC)等多种分离技术对叶瓜参粗多糖进行分离纯化得到以下均一多糖组分,CFG-1(得率为5.480%)、CFG-2(得率为6.351%)、CFG-3(得率为6.724%)。上述叶瓜参多糖组分经HPGFC检测均一性较好,经紫外检测不含蛋白质和氨基酸。本实验所得叶瓜参多糖组分样品均为乳白色絮状粉末,质地疏松,易溶于二甲基亚砜和水,不溶于丙酮、乙醇等有机溶剂,硫酸-苯酚反应呈阳性。CFG-1:相对分子量为1,011Da;CFG-2:相对分子量为103,329Da;CFG-3:相对分子量为96,219Da。它们的单糖组成、含量和比例存在一定的差异,同时糖苷键类型也不同。叶瓜参多糖组分中主要有木糖、葡萄糖和岩藻糖,并且多糖样品基本含有羧基、羟基、硫酸酯基以及岩藻糖的甲基,其中不同海参多糖硫酸酯基的取代位点略有差异。对叶瓜参总多糖的蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP1B)活性抑制试验显示,其对PTP1B具有显著的抑制活性,在20μg/ml的浓度时,抑制率为94.57%,表明叶瓜参总多糖具有良好的抗糖尿病作用,可应用于抗糖尿病药物及保健功能食品的研究开发。
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