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目的:创建豚鼠创伤性鼓膜穿孔实验模型,评估血竭蜈蚣油在创伤性鼓膜穿孔修复中的作用。 方法:1.造模:取豚鼠45只,每只给予戊巴比妥钠(35mg/kg)于豚鼠腹腔麻醉注射,用检耳镜暴露鼓膜,可清楚看到鼓膜的紧张部,用灼热针尖刺开后下象限并制成统一大小圆形穿孔(直径约3mm)。术后每天给予豚鼠后腿肌肉注射氨苄青霉素(150mg/kg)一次以预防感染,连续5日。2.实验方法:造模成功后将45只豚鼠随机分为3组,第一组双耳给予血竭蜈蚣油高浓度贴补(1g/ml),第二组双耳给予血竭蜈蚣油低浓度贴补(0.5g/ml),第三组双耳给予注射用油贴补(0.1ml),每组不少于15只(30只耳)。在首次用药治疗的第3、5、7、10、14天,三组分别随机选取3只豚鼠(6只耳)处死,取出完整的鼓膜标本,对取得的鼓膜标本记录拍照,后用10%甲醛溶液固定,常规酒精梯度脱水、石蜡包埋、切片,进行常规HE染色及免疫组化检测。用SPSS15.0统计软件对资料进行统计学处理,两组间采用配对样本t检验方法,两均数比较,当P<0.05时表明具有统计学差异。 结果:1.造模后24小时内,有2只豚鼠因为麻醉原因而死亡,被剔除。 2.第10天时肉眼观察高浓度组鼓膜穿孔基本已经愈合,与豚鼠正常鼓膜形态相近。 3.高浓度组上皮层、中间纤维组织生长情况优于对照组。其中鼓膜中间纤维层厚度明显优于对照组。低浓度组与高浓度组相对比,低浓度组中间纤维层排列不齐。 4.高浓度组与对照组b-FGF、TGF-α表达值在第3天、第5天、第7天、第10天和第14天时差异均有统计学意义(P<0.05),高浓度组高于对照组b-FGF、TGF-α的表达值;高浓度组与低浓度组的表达值在第3天、第5天和第7天时差异有统计学意义(P<0.05)。 结论:1.血竭蜈蚣油能够提高生长因子b-FGF、TGF-α在创伤性鼓膜穿孔修复过程中的表达。 2.血竭蜈蚣油能够使鼓膜上皮层和纤维层共同生长,从而缩短创伤性鼓膜穿孔修复的时间,促进鼓膜愈合。 3.高浓度血竭蜈蚣油较低浓度适合临床使用,可成为临床用药。