【摘 要】
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骨关节炎（osteoarthritis,OA）是一种常见的退行性关节疾病,不断增长的老年人口将导致全球OA发病率增加。间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）具有自我更新、多向分化的能力,并能分泌多种生物活性因子,已经成为治疗OA的一种很有前途的方法。脂肪来源（adipose derived-,AD-）和脐带来源（umbilical cord derived-,UC-
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骨关节炎（osteoarthritis,OA）是一种常见的退行性关节疾病,不断增长的老年人口将导致全球OA发病率增加。间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）具有自我更新、多向分化的能力,并能分泌多种生物活性因子,已经成为治疗OA的一种很有前途的方法。脂肪来源（adipose derived-,AD-）和脐带来源（umbilical cord derived-,UC-）的MSCs是再生医学中具有前景的细胞来源,然而,很少有研究比较它们的成软骨分化能力以及治疗OA的作用。利用CCK-8实验对AD-MSCs和UC-MSCs的体外增殖能力进行研究,实验方法为:对两种细胞进行消化计数,以每孔2000个细胞的密度接种于96孔板,每孔100μL培养液;接种后24 h,向孔板中加入CCK-8溶液,每100μL培养液中加入10μL CCK-8溶液;将孔板放入二氧化碳细胞培养箱中孵育2 h;利用酶标仪检测450 nm处的吸光度,以同样的方法,连续测定4 d。结果证明:UC-MSCs的增殖能力显著高于AD-MSCs。利用Pellet方法诱导细胞成软骨分化,实验方法为:对两种细胞进行消化计数,以5×105个细胞的密度将细胞培养在含有完全软骨诱导培养基的15 m L离心管底部,放入二氧化碳培养箱中连续培养5周,每3 d换液一次。24 h后观察到细胞微团出现。为了比较两种细胞的成软骨分化潜力,对诱导形成的Pellet细胞微团进行冰冻切片,再进行病理学染色和GAG含量测定,结果证明:UC-MSCs和AD-MSCs的成软骨分化潜力相差无几。最后利用前交叉韧带横断（ACLT）的手术方法诱导SD大鼠膝关节OA模型,来比较UC-MSCs和AD-MSCs对OA的延缓作用。对收集的关节样本进行固定、脱钙、脱水、石蜡包埋、切片处理;病理学染色、免疫组化染色以及TUNEL染色的结果证明ACLT造模成功,关节内注射两种细胞均能显著改善OA进展,恢复蛋白聚糖含量,抑制软骨细胞凋亡,且两种细胞的作用效果没有显著差异,仅单次关节内注射细胞就可以达到很好的治疗效果。
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