【摘 要】
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目的:叶酸是参与DNA复制、氨基酸合成和维生素代谢等生化反应必要的营养物质之一。研究发现叶酸缺乏不仅会引起胚胎神经管和心血管系统的发育异常,后天多种肠道病变(克罗恩病
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目的:叶酸是参与DNA复制、氨基酸合成和维生素代谢等生化反应必要的营养物质之一。研究发现叶酸缺乏不仅会引起胚胎神经管和心血管系统的发育异常,后天多种肠道病变(克罗恩病、肠易激综合征、结肠癌)的发生发展也与叶酸缺乏有着密切的关系。本实验通过建立SD母鼠叶酸缺乏模型,探讨母体叶酸缺乏对子代乳鼠肠道粘膜屏障功能发育的影响。方法:以SD大鼠为研究对象,先将40只SD成年雌鼠随机分为叶酸缺乏组(给予无叶酸饮食喂养)和标准饮食组(给予标准饮食配方),每组雌鼠各20只。两组雌鼠按各组规定的饮食方案喂养两个月后,将两组雌鼠分别与标准饮食的成年雄鼠进行合笼交配。两组雌鼠成功受孕后生产后,将叶酸缺乏组母鼠生产的子代乳鼠称分为实验组、标准饮食组母鼠生产的子代乳鼠分为对照组。各组于生后一周随机选取20只处死,并留取肠道组织。采用HE染色法观察肠道组织粘膜的发育情况,免疫组织化学方法分析肠粘膜溶菌酶、黏蛋白2(MUC2)和粘膜细胞间紧密连接蛋白(ZO-1、Claudin-1)的表达情况,并在基因和蛋白水平检测了 ZO-1、Claudin-1 的表达。结果:HE染色观察发现实验组小肠及结肠肠壁厚度明显变薄、肠隐窝数量减少、肠绒毛萎缩。免疫组织化学显示:实验组小肠粘膜组织中溶菌酶被染指数明显下降,结肠粘膜中溶菌酶被染指数下降不明显。小肠和结肠组织中MUC2、ZO-1、Claudin-1的表达量均明显降低;与对照组相比,实验组小肠、粘膜ZO-1,Claudin-1的基因表达明显下降。q-PCR结果显示:实验组小肠及结肠ZO-1mRNA、Claudin-1 mRNA的表达较对照组下降;Western蛋白印迹法结果显示ZO-1,Claudin-1的蛋白水平与基因水平表达结果一致。结论:SD母鼠叶酸缺乏对子代乳鼠肠道屏障功能发育有一定的影响。叶酸缺乏可引起子代乳鼠肠道屏障功能发育异常:主要表现肠道粘膜结构的发育不良、肠道上皮细胞(潘氏细胞、杯状细胞)的功能异常、肠道ZO-1,Claudin-1表达下降。
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