人参与胡萝卜原生质体培养再生植株的研究

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人参(Panax ginseng C.A.Mey.)是我国传统中药材。在地理分布上十分局限,对生态环境要求甚严,野生资源接近枯竭,多年来药用人参的大部分都依靠人工栽培生产。由于人工栽培人参生长周期长,对栽培条件要求严格,栽培管理技术复杂,使栽培人参质量难以控制。为此多年来科学家们不断努力研究人参组织细胞培养。胡萝卜(Daucus carota var.sativus Hoffm.)是一种营养丰富,易于种植,抗旱性、抗涝性、抗病虫害能力强的保健蔬菜。历来作为遗传学与细胞工程的模式材料。近年来生物技术的不断成熟进步和发展为种质资源的创新与改良提供了新的途径,基因或基因组的转移及体细胞杂交技术使得打破自然界物种之间的生殖隔离成为了可能。本次试验以人参和胡萝卜为材料,建立愈伤组织培养体系和胚性悬浮系。以人参胚性悬浮系作为原生质体分离的材料,进行了原生质体的分离和电融合以及原生质体培养,对相关影响因素进行了研究,获得了人参再生植株、胡萝卜再生植株、人参与胡萝卜原生质体电融合产物再生愈伤。为人参与胡萝卜杂种植株的获得奠定基础。结果如下:1.诱导了人参与胡萝卜的愈伤组织,并进一步诱导了胚性愈伤组织,设计了激素自养型人参胚性愈伤组织诱导的Box-Behnken优化实验。2.建立了人参与胡萝卜的胚性悬浮系,设计了人参胚性悬浮系建立的Box-Behnken优化实验,为原生质体分离做好准备。3.进行了人参与胡萝卜原生质体的分离,设计了人参胚性悬浮系原生质体分离的Box-Behnken优化实验,原生质体电融合做好准备。4.进行了人参与胡萝卜胚性悬浮系原生质体的电融合,获得了电融合产物。5.进行了原生质体培养,获得了人参再生愈伤与胚状体、胡萝卜再生愈伤与胚状体以及电融合产物的再生愈伤。6.进行了培养再生植株的实验,获得了人参再生植株、胡萝卜再生植株以及融合产物再生胚状体。7.对三种再生愈伤组织进行了理化指标与有效成分测定比较,4组电融合产物再生愈伤组织人参皂苷含量均高于人参再生愈伤组织。
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