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茶黄素是红茶的重要品质成分和功能成分,而且具有多种生物学活性,如降血脂、抗氧化、抗衰老、抗突变等,在某些功能方面甚至优于儿茶素。本研究建立UVB诱导HaCaT细胞光老化模型,使用茶黄素混合物及单体对模型进行干预,检测光老化细胞衰老相关指标,分析茶黄素对光老化细胞的保护作用,为红茶茶黄素预防和治疗皮肤光老化提供理论依据。主要研究结果如下:1、采用MTT法测定茶黄素混合物及四种茶黄素单体对光老化(HaCaT)细胞增殖率的影响。结果表明,茶黄素混合物(5-100μg/mL)均能显著提高细胞活力,可明显促进细胞增殖,其中0-25μg/m L茶黄素混合物对细胞增殖随浓度增大而加强。四种茶黄素单体均能不同程度的提高细胞相对活力,促进细胞增殖。其中茶黄素单体TF3’G对HaCaT细胞活性提高效果最好,与模型组相比能够显著提高细胞活性。TF、TF3G、TF3’G、TFDG四种茶黄素单体的EC50值分别是0.427±0.032、0.196±0.008、0.175±0.023、0.278±0.057。四种茶黄素单体对光老化HaCaT细胞增殖率影响效果由强到弱依次为TF3’G>TF3G>TFDG>TF。TF3’G、TF3G、TFDG单体对光老化HaCaT细胞增殖效果明显高于茶黄素单体TF单体。2、基于光老化模型,研究了TF3’G对UVB诱导HaCaT细胞光老化的保护作用,检测了细胞内抗氧化酶(GSH-Px、SOD、CAT)活性、氧化产物(MDA)含量及氧化反应(LDH)变化、细胞内氧化水平(ROS)变化、线粒体膜电位变化等指标。结果表明,与模型组比较,TF3’G处理组SOD,CAT,GSH-Px活性明显上升,LDH活性降低、MDA含量和ROS水平显著降低,细胞膜电位水平逐渐升高。随着TF3’G浓度的增大,SOD,CAT,GSH-Px活性升高越明显;LDH活性、MDA含量随着TF3’G浓度增大降低明显,且与剂量有依存关系,四个剂量中以高剂量TF3’G处理效果最为明显。在UVB辐射作用下,HaCaT细胞内产生大量的自由基,线粒体膜完整性被破坏,从而线粒体膜电位下降。UVB辐射造模后,加入TF3’G孵育,减少细胞自由基产生,抑制线粒体膜电位下降。表明TF3’G能够有效修护线粒体膜完整性,保护HaCaT细胞形态,从而起到抗光老化作用。3、采用Annexin V-FITC试剂盒检测TF3’G对光老化(HaCaT)细胞凋亡率的影响;RT-PCR检测TF3’G对光老化(HaCaT)细胞中SOD、CAT、Bax、Bcl-2、Mfn2、Opal、Caspase-3的mRNA表达水平的影响。结果表明,与空白对照组相比,模型组细胞结构改变,细胞凋亡率显著升高,细胞内SOD、CAT、Bcl-2、Mfn2、Opal的mRNA表达水平显著降低,Bax、Caspase-3的mRNA表达水平显著升高;与模型组比较,TF3’G处理组细胞结构改善,凋亡率显著降低,高剂量TF3’G组SOD、CAT、Bcl-2、Mfn2 mRNA表达水平均有升高,Opa1mRNA表达水平升高不明显,Bax、Caspase-3的mRNA表达水平均有降低。说明TF3’G可修复细胞结构,促进抗氧化酶基因SOD、CAT和线粒体融合基因Mfn2以及抗凋亡因子Bc1-2的表达,抑制促凋亡因子Bax和Caspase-3的表达,从而减少UVB诱导的HaCaT细胞凋亡,从而对光老化细胞起到保护作用。