梨皮化学成分的LC-MS和NMR研究

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梨为蔷薇科(Rosaceae)、苹果亚科(Maloideae)、梨属(Pyrus)落叶乔木,梨是富含酚酸和黄酮类物质的一种水果。梨皮中含有丰富的黄酮、有机酚酸类化合物,具有抗菌、消炎、抗肿瘤、防治冠心病与中风等心脑血管疾病的药理活性。梨皮通常作为废弃物,其价值常被忽视,因此,系统地鉴定梨皮中化学成分,有利于对梨皮的资源利用与开发。目前国内外对于梨皮中酚类的物质研究主要采用的是高效液相和四级杆、离子阱等低分辨率的质谱,尚未见四极杆-飞行时间质谱(Q-TOFMS)对梨皮进行系统研究的报道。本研究利用高效液相色谱(HPLC)-二极管阵列检测(DAD)-电喷雾(ESI)-四极杆飞行时间串联质谱(QTOF-MS)和NMR分析技术,主要对梨皮进行了以下两个方面的研究工作:采用HPLC-DAD-ESI-Q-TOF-MS联用技术对香梨和雪花梨两种梨皮提取物中化学成分进行了快速定性分析,结合高分辨质谱数据、紫外吸收光谱与文献鉴定出25种酚类物质。采用反相C18色谱柱,以乙腈(含0.05%甲酸)-水(含0.05%甲酸)为流动相进行梯度洗脱,对两种梨皮提取物中成分色谱峰进行较好分离,通过记录正、负两种电喷雾离子模式质谱数据,根据这些成分色谱保留时间、高分辨质谱及紫外光谱数据,结合参考文献数据分析,初步鉴定出其中的25种酚类物质,主要是黄酮糖苷类、酚酸类化合物和熊果苷等。研究结果表明,采用高效液相色谱-电喷雾-四极杆飞行时间质谱联用技术可以简单高效地初步鉴定出香梨和雪花梨果皮中的酚类物质。通过NMR波谱技术,对梨皮粗提取物直接进行分析,采集提取物的1H NMR与1H-1H COSY、1H-1H TOCSY、1H-13CHSQC、1H-13C HMBC等二维核磁谱,鉴定出混合物中含量较高的葡萄糖、蔗糖、乳酸、苹果酸、奎宁酸、熊果苷和咖啡酸等11种化学成分。在梨皮提取物的HPLC-DAD-ESI-Q-TOF-MS分析中,检测到一些吸收强度较高的色谱峰,本研究采用LC-DAD-SPE-NMR联用技术对其进行了分析,采集一维’HNMR和1H-1H COSY、1H-13C HSQC、1H-13C HMBCh等二维核磁谱,通过数据分析鉴定出槲皮素-3’-O-鼠李糖苷-3-O-阿拉伯糖葡萄糖苷、槲皮素-3-O-阿拉伯糖葡萄糖苷、芦丁、木犀草素-7-O-葡萄糖苷、异鼠李素-3-0-鼠李糖葡萄糖苷等5种黄酮类化学成分,鉴定结果进一步确认了HPLC-DAD-ESI-Q-TOF-MS分析中对梨皮化学成分鉴定结果的可靠性。本研究采用LC-MS与NMR技术,对两种梨皮中化学成分进行了较系统的研究,共鉴定出的35种化学成分。这些研究结果可为梨皮的开发和利用提供基础数据。
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