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本论文以油橄榄叶降糖有效部位为研究对象,分别开展其对糖代谢关键酶α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的抑制作用。在此基础上,利用离线二维高速逆流色谱技术对油橄榄叶降糖有效部位中的主要有效成分进行了分离制备,从中得到3个化合物。具体的研究内容包括以下2个方面:1.将油橄榄叶降糖有效部位在BMKX-4大孔吸附树脂柱上进行吸附,依次用20%、40%、60%、80%乙醇梯度洗脱,得到A、B、C、D 4个组分,然后分别考察A、B、C、D这4个组分对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的抑制作用,并利用高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)对各组分中4个共有化合物羟基酪醇乙酰脂(X1)、橄榄苦苷(X2)、女贞苷(X3)、2″-epifraxamoside(X4)进行分析,考察其含量与酶抑制活性的相关性。结果表明,组分A对α-葡萄糖苷酶的抑制作用最强,组分C对α-淀粉酶的抑制作用最强。X1、X3与对α-葡萄糖苷酶的抑制率呈正相关,X2、X4与抑制作用呈负相关;X2、X4与对α-淀粉酶的抑制率呈正相关,X1、X3与抑制作用呈负相关。验证了本课题组前期筛选得到的油橄榄叶降糖有效部位对糖代谢过程中的两种关键酶均具有较好的抑制作用,其中X1、X3可能是抑制α-葡萄糖苷酶的主要活性成分,而X2、X4可能是抑制α-淀粉酶的主要活性成分。2.利用离线二维高速逆流色谱技术,对油橄榄叶降糖有效部位中的主要有效成分进行了分离制备的研究。首先,利用高速逆流色谱建立了一种快速分离制备油橄榄叶降糖活性部位中橄榄苦苷的方法。优化的色谱条件为:正丁醇-乙酸乙酯-甲醇-水-氯仿(1:19:1:19:0.4,v/v)作为两相溶剂系统,上相作为固定相,下相作为流动相,转速为900 rpm,同时考察了流速及进样量对橄榄苦苷分离度的影响,得出当流速为1.5m L·min-1,进样量浓度为20 mg·m L-1时,利用该方法,从油橄榄叶降糖有效部位中分离得到的橄榄苦苷,其纯度达到90.5%,且可以进行大量制备。其次,是将除去大量橄榄苦苷后所有的洗脱液(包括保留在柱色谱中的组分),优化后选择溶剂系统正丁醇-乙酸乙酯-水(1:2:3,v/v),上相作为固定相,下相作为流动相,转速为900 rpm,流速为2.0 m L·min-1,进样量浓度为2 mg·mL-1。采用高速逆流色谱的双洗脱模式,分离得到羟基酪醇和木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷2个化合物,其纯度分别为95.3%和91.2%。