论文部分内容阅读
背景:水稻是世界上最重要的粮食作物之一,也是基础研究的模式植物之一。由Xanthomonas oryzae pv.oryzae (Xoo)引起的水稻白叶枯病,是一种严重的细菌性病害。水稻遭受白叶枯病菌侵染会严重减产,甚至绝收,对抗病基因介导的抗病分子机理研究对水稻生产具有重要的意义。类Tubby蛋白质(Tubby-like protein,TLP)在动植物中广泛存在,已有研究表明,水稻TLP家族成员在生长发育和抗病过程中发挥着重要作用。研究目的:制备针对水稻TLP基因编码蛋白质的相应抗体,了解水稻TLP基因编码蛋白质在不同发育时期的表达信息,为功能研究积累数据。材料与方法:对候选基因编码的蛋白质进行抗原决定簇的预测,选出抗原决定簇峰值较高的片段后,合成多肽偶联后免疫兔子制备多克隆抗体。用Western Blotting检测TLP基因编码蛋白质在水稻品种93-11苗期1cm、2cm、5cm、10cm和15cm、分蘖期、孕穗期、开花期和成熟期的叶片的表达,与水稻MPSS数据库中叶片苗期和分蘖期的转录信息进行比较分析。结果:利用Western blotting检测了14个TLP基因编码蛋白质在水稻叶片不同生长时期的表达,揭示了其表达模式。随后对Xa21介导的水稻白叶枯病抗性反应不同时间点进行检测,发现OsTLP2、OsTLP7、OsTLP8、OsTLP9等4个蛋白质的表达发生了变化,进一步比较它们在抗病、感病和对照处理中的表达情况,发现不同反应间的表达也有区别。结论:通过对14个TLP基因编码的蛋白质在水稻苗期、分蘖期、孕穗期、开花期和成熟期叶片中的表达谱研究,直观且相对定量地揭示了TLP基因编码蛋白质的表达与水稻叶片生长和抗白叶枯病之间的关系。蛋白质的存在及表达量的变化与其抗病功能密切相关,为揭示TLP蛋白质在水稻正常生长及抗病反应等生命活动中的功能提供依据。