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目的：肿瘤是一种常见疾病，随着生活水平的提高，发病率和死亡率在全球呈上升趋势，严重威胁人类健康。肿瘤是机体在各种因素作用下，局部组织细胞在基因水平上失去了对其生长的正常调控，导致细胞的异常增生或凋亡不足而形成的新生物。生物功能的主要体现者是蛋白质。复杂的基因间和蛋白质间的相互作用、细胞内的活动以及环境的影响都会影响基因的表达及蛋白质的翻译后加工。随着人类基因组全序列草图的完成，肿瘤的研究已经从基因水平向蛋白质水平深化。寻找与肿瘤发生发展相关的新的蛋白质，对肿瘤的诊治将起到重要作用。PDIA6是我们实验室通过高通量实验筛选出来的肺鳞癌相关蛋白。本实验拟对临床肺鳞癌的组织进行PDIA6蛋白表达检测，验证PDIA6蛋白在肺鳞癌与癌旁组织中的表达情况。在Hela细胞系中检测PDIA6与肿瘤发生发展的相关性及分子机制。并进一步用PDIA6转染肺鳞癌细胞系NCI-H520，筛选稳定细胞系，进行深入研究。我们希望通过对PDIA6的研究为肿瘤诊治提供新切入点。方法：1．利用Western blotting实验检测PDIA6在肺癌组织以及癌旁组织中的表达差异。2．利用pCMV-sport6-PDIA6质粒瞬时转染Hela细胞,用MTT法、克隆形成实验检测PDIA6过表达对Hela细胞生长的影响；荧光素酶双报告基因筛选PDIA6对肿瘤相关信号转导通路的激活作用；Western blotting实验检测PDIA6过表达对Hela细胞中几种肿瘤相关蛋白表达的影响。3．利用pEGFP-N1-PDIA6转染肺鳞癌细胞系NCI-H520，筛选出PDIA6稳定过表达的细胞系，Western blotting实验检测PDIA6过表达对NCI-H520细胞中几种肿瘤相关蛋白表达的影响。结果：1．Western blotting实验结果表明：PDIA6蛋白在肺癌组织中的表达明显高于癌旁组织(p﹤0.05)。2．转染pCMV-sport6-PDIA6的Hela细胞经MTT实验发现PDIA6促进Hela细胞增殖；平板克隆形成实验结果表明PDIA6转染后，Hela细胞的克隆形成数明显高于对照组细胞（p﹤0.05）；荧光素酶双报告基因检测结果提示PDIA6对Wnt信号转导通路有激活作用。转染pCMV-sport6-PDIA6的Hela细胞中PDIA6、CCND1、β-catenin蛋白表达明显高于转染空载体的Hela细胞(p﹤0.05)；而Bax、Caspase3蛋白表达明显低于转染空载体的Hela细胞(p﹤0.05)。3．获得的PDIA6过表达的细胞系NCI-H520，此细胞中PDIA6、CCND1、β-catenin蛋白的表达明显高于转染空载体的NCI-H520细胞(p﹤0.05)；而Bax、Caspase3蛋白表达明显低于转染空载体NCI-H520细胞(p﹤0.05)。结论：1．PDIA6可能通过激活Wnt信号通路促进Hela细胞增殖。2．PDIA6过表达可引起Hela细胞中Bax、Caspase3蛋白表达降低，可能有抑制肿瘤细胞凋亡的作用。3．PDIA6可能为肺鳞癌相关蛋白，其过表达可引起肺鳞癌细胞中CCND1、β-catenin蛋白表达增高，而Bax、Caspase3蛋白表达降低。