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研究目的：本实验以小鼠神经小胶质细胞株BV2细胞为模型,利用细胞因子芯片、酶联免疫吸附试验(Enzymes linked immunosorbent assay,Elisa)及实时定量RT-PCR技术,研究伯氏疏螺旋体重组膜蛋白A (recombinant Borrelia burgdorferi membrane protein A,rBmpA)刺激小胶质细胞产生趋化因子的作用,为探索神经莱姆病(Lyme neuroborreliosis,LNB)的发病机制提供科学依据。研究方法：1、96孔细胞培养板培养BV2细胞[培养基为5%CS-DMEM(高糖)培养基,细胞浓度3×105/mL,体积100μL],培养6-12小时,待其完全贴壁后弃去培养基,用10μg/mL及20μg/mL rBmpA分别处理BV2细胞,在作用6小时、12小时、24小时后收集细胞培养上清液,以及相应的细胞裂解液。2、将收集的12h、24h细胞上清液每组各取150μL,用细胞因子芯片广泛筛查多种趋化因子的含量。3、用ELISA法检测细胞上清液中趋化因子CXCL2、CCL22、CCL5、 CXCL13的相对含量。4、设计特异性引物扩增目的基因(CXCL2、CCL22、CCL5、CXCL13)和内参基因(GAPDH),将高品质的RNA反转录为cDNA,运用实时荧光PCR(qRT-PCR)检测细胞裂解液中趋化因子CXCL2、CCL22、CCL5、CXCL13 mRNA转录水平,利用计算相对表达量法进行相对定量分析,应用统计软件对其进行统计学分析。研究结果：1、与正常对照组相比,rBmpA对小鼠神经小胶质细胞BV2作用后,细胞上清中趋化因子CXCL2、CCL22、CCL5相对含量明显增多,且与rBmpA呈浓度依赖上调。2、与正常对照组相比,rBmpA对小鼠神经小胶质细胞BV2作用后,细胞裂解液中相应趋化因子CXCL2、CCL22、CCL5的mRNA相对表达量明显增高。3、6h时,rBmpA刺激小鼠神经小胶质细胞BV2产生趋化因子CXCL13的作用不明显。结论：1、神经莱姆病的炎症反应参与趋化因子CXCL2、CCL22、CCL5的细胞来源可能为神经小胶质细胞2、rBmpA刺激小鼠神经小胶质细胞BV2分泌趋化因子CXCL2、CCL22、CCL5,可能与神经莱姆病的发生有关。