目的：放射治疗是头颈部恶性肿瘤的有效治疗手段之一，但临床与基础实验均发现放射治疗能造成病人和动物感音神经性聋，目前对这一发病机理尚不甚明了，而且也没有有效的治疗药物。NO作为一种新的信息分子和效应分子，广泛参于机体内各系统的生理调节和病理损伤。现已知听觉系统内也有NO存在，主要分布于上橄榄核，前庭神经节，内毛细胞、外毛细胞的胞浆，血管纹的基底以及所有结构的血管内皮中，其功能推测主要是在内耳中起神经递质／调质的作用及调节前庭和耳蜗的血流。但内耳结构复杂，有关内耳NO研究较少，尤其是对病理条件下NO的作用的相关研究更少。丹参是一种扩张血管、促进微循环的中药，耳科临床主要用于突发性聋、老年性聋、噪声性聋等的治疗，尚未见有用于放射线所致的感音神经性聋。本实验主要观察放射线对耳蜗的功能和形态学上的损害情况，探讨放射性内耳损伤中NO所起的作用及丹参是否能改善这一损伤。 材料与方法：将24只健康的白毛红目豚鼠耳随机分成对照组，照射组，丹参／照射组，每组8只。对照射组和丹参╱照射组豚鼠耳颞部进行⁶⁰钴γ射线照射，每次20Gy，每天一次，连续三天共60Gy，进行照射的前一天开始给丹参╱照射组动物腹腔注射丹参注射液8g.kg^-1.d^-1，连续8天，对照组动物每天给予等量生理盐水，连续8天。ABR 中文摘要 （脑干电反应测听）检测照射前后动物听阈变化并对结果进行统计学分析。扫描电镜和透射电镜观察照射及用药前后耳蜗的超微结构改变，免疫组化ABC法研究耳蜗中iNOS的活性表达，利用图象分析技术对照射前后WOS活性表达的强弱进行灰度分析。 结果：用药前后正常对照组ABR显示听阈无改变；照射组听力明显下降（P＜0．of），丹参／照射组听力也有不同程度下降，但其下降程度与照射组比较有明显减小件0．05卜光镜及电镜均显示放射对耳蜗的血管纹，内、外毛细胞和螺旋神经节等结构造成明显损害。扫描电镜下见正常对照组螺旋器上的内、外毛细胞的纤毛排列整齐；照射组螺旋器内、外毛细胞的纤毛大部分发生倒伏融合，排列散乱，有的己消失：而丹参／照射组的纤毛与照射组比较有明显好转，只有少数部位有纤毛的倒伏融合现象。透射电镜下，对照组耳蜗螺旋器的各细胞结构正常：照射组的毛细胞线粒体肿胀，晴减少，空泡变性；丹参／照射组螺旋器各细胞结构也有轻度变性，但较照射组明显减轻。免疫组化结果显示正常对照组螺旋器各部位结构正常，均未见棕黄色颗粒，呈iNOS阴性染色；照射组的螺旋器结构散乱，内、外毛细胞发生变性，胞浆内充满棕黄色颗粒，呈iNOS强阳性表达；而丹参／照射组螺旋器各部位iNOS阳性反应物的分布区域与照射组相比无明显不同，但棕黄色颗粒染色程度明显减轻。图象灰度分析数据显示丹参／照射组的灰度值比照射组大，即iNOS的活性低，经统计学检验差异有显著性意义u检验，尸no．of)分别对照射组和丹参／照射组的ABR结果和iNOS的灰度 2 中文摘要 分析值进行相关性分析，发现二者呈正相关。 结论：由照射组ABR及光镜、电镜结果可以看出， 放射治疗对耳蜗造成了严重的损伤，而免疫组化研究结果 显示在这一过程中放射线激活了iNOS，活化的iNOS催 化L－精氨酸产生大量的NO，过量的NO有很强的细胞毒 性和神经毒性，其具体的病理损伤机制是：NO化学性质 极为活泼，遇超氧阴离子（O”5）反应生成过氧化硝基阴 离子（ONOO入而 ONOO易分解成羟基游离基个OH）和 H氧化氮(NO＊，ONOO、0H及NO。的氧化性都很强， 可以阻止线粒体的呼吸及DNA合成酶，造成细胞膜，蛋 白质核酸酶类的损伤；另外NO可与DNA发生硝基化反 应，造成DNA脱硝基和碱基变构，可见NO的毒性作用 在放射性内耳损伤中占有重要地位。而在照射同时给予了 丹参的豚鼠，其听力下降程度和电镜、光镜显示的形态损 伤程度均较照射组明显减轻，iNOS的活性表达也有下降， 说明丹参对放射线造成的内耳损伤有保护作用，丹参是一 种话血化瘀，促进微循环的中药，从本实验丹参／照射组 WOS活性表达看给予丹参后iNOS活性降低，说明丹参 同时也有降低iNOS活性的作用。 可以得出结论，放射性内耳损伤中NO的毒性作用是 其重要机制之一；丹参对这一损伤有保护作用，其保护作 用的机制之一是降低了WOS的表达活性。