猪精液常温保存是人工授精的主要环节,细菌污染是公猪精液常温保存所面临的主要障碍之一。细菌污染会导致精子质量参数降低和产生氧化应激。公猪精液中活性氧(ROS)的含量是一把双刃剑,微量的ROS能维持精的获能及其他代谢功能;然而过量的ROS会导致精子DNA断裂,质膜破损和线粒体损伤等,影响精子的正常生理功能。曲酸为天然细菌代谢产物,其具有较强的抗菌能力。前期研究表明,添加曲酸能通过抑制细菌的生长来提高公猪精液常温保存质量和总抗氧化能力。本研究旨在于在精液稀释液中添加曲酸,并在17℃保存的第5天测定曲酸对公猪精子的精卵结合、体外受精参数、线粒体空泡化和固缩、抗凋亡蛋白、促凋亡蛋白,获能精子运动参数,蛋白质酪氨酸磷酸化和精子获能的影响。本研究获得的主要结果如下:1.添加0.04 mg/mL的曲酸显著提高卵母细胞结合精子数量、雌雄原核形成率、卵裂率和囊胚率(P<0.05)。其中,最佳体外受精的精卵结合浓度为2.0×10~4,其能显著抑制多精入卵,促进早期胚胎发育(P<0.05);2.添加0.04 mg/mL的曲酸能通过减少活性氧的产生降低线粒体空泡率和固缩,显著性抑制细胞色素C从精子线粒体释放至胞质(P<0.05),促进精子抗凋亡蛋白(Bcl-2)表达(P<0.05),抑制促凋亡蛋白(Bax,Caspase-3和Caspase-9)的表达(P<0.05);3.添加0.04 mg/mL的曲酸能显著提高获能后精子的运动参数,提高精子获能相关蛋白质酪氨酸磷酸化水平,提高获能成功型精子所占的比例,抑制精子发生顶体反应(P<0.05)。综上所述,添加0.04 mg/mL的曲酸提高了猪精卵结合率,促进了体外早期胚胎发育,其机制与提高获能精子蛋白质酪氨酸磷酸化水平与抑制精子凋亡有关。