灰树花水溶性β-葡聚糖的制备和结构研究

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灰树花(Grifola frondisa)是一种名贵食用与药用真菌,具有抗肿瘤等多种生物活性。目前,已经能用发酵工程技术对其进行大规模发酵,获得大量菌丝体。 本文以灰树花发酵菌丝体为原料,经过乙醇脱脂,用热水提取获得GFM1水溶性杂多糖组分;用冷碱提取分离得到水溶性β-葡聚糖组分GFM3;用热碱提取分离得到水溶性β-葡聚糖组分GFM4。经进一步分离纯化,从冷碱提取组分GFM3中得到GFM3P1与GFM3P2组分;从热碱提取组分GFM4中得到了GFM4P2组分。经各种化学与波谱分析表明,GFM3P1与GFM4P2均属于β—葡聚糖,而GFM3P2则是一种β—葡聚糖肽,且GFM3P2中糖链与肽链之间的连接方式主要为O-连接。经过对该肽链氨基酸的组成分析表明,该肽链含有16种氨基酸,其中酸性氨基酸含量丰富。经刚果红结合实验表明,GFM3P1、GFM3P2的超螺旋结构容易被0.2mol/L NaOH破坏,而GFM4P2则相反,其超螺旋结构不能被2mol/L NaOH水溶液破坏。结构研究表明,GFM4P2为β—1,6主链及β—1,3支链的新型β-葡聚糖,分枝度为36.4%,该结构属于首次报导。 本文进一步利用结构确定的纯品多糖GFM3P1与GFM4P2,初步评价了它们抗肿瘤活性。结果表明,GFM3P1的抑瘤率是65%,GFM4P2的抑瘤率是73%,均高于临床应用的香菇多糖的抑制率(35%);且具有提高小鼠免疫的功能,提示该类多糖具有开发为抗肿瘤药物的前景。
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