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目的:研究砒霜对于白血病细胞HL-60、K562和淋巴瘤细胞RL的抗癌效果及形态学的分析,探讨其诱导细胞apoptosis和oncosis的分子生物学机制。
方法:①MTT方法测定砒霜的抗癌效果。②Giemsa染色和位相差显微镜观察细胞形态学变化。③流式细胞仪测定细胞周期、细胞CD95/CD95L、CD40和Bcl-2的表达。④荧光光度仪测定细胞caspase8和3的活性。⑤抗CD95抗体阻断CD95/CD95L通路,测定对细胞死亡的影响。
结果:砒霜在低浓度(1.0μM-2.0μM)对于HL-60、K562和RL有很好的抗癌效果。从形态学分析显示砒霜诱导HL-60和RL细胞apoptosis,对于K562细胞诱导oncosis。在此过程中都激活CD95通路,上调CD95/CD95L的表达,激活caspase8和3,抗CD95抗体阻断CD95/CD95L通路后,部分阻断砒霜诱导细胞apoptosis。诱导apoptosis过程中Bcl-2和CD40的下调,而oncosis则无变化。
结论:①砒霜对于HL-60、K562和RL有很好的抗癌效果。
②砒霜诱导HL-60和RL细胞apoptosis,K562细胞oncosis。
③CD95/CD95L通路是砒霜诱导细胞死亡信号通路。
④Bcl-2和CD40可能是引起两种死亡方式不同的靶点。