多肽和适配体调控GO纳米酶催化活性SERS光谱检测HCG和Hg(Ⅱ)

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1、绪论  对表面增强拉曼光谱技术研究进展、SERS增强机理、SERS光谱技术分析应用进展、共振瑞利散射光谱技术及其在环境中的分析应用进展进行了介绍。综述了纳米酶、主要纳米酶种类与制备方法、纳米酶催化技术研究进展。对核酸分析技术及其在不同领域的分析应用进展进行简要概述。介绍了人绒毛膜促性腺激素和汞离子的分析研究进展。简要讲述本课题主要研究内容和研究意义。  2、多肽和抗体调控GO纳米酶催化活性SERS光谱检测HCG  在水浴条件下, H2O2或柠檬酸三钠等还原HAuCl4反应进行缓慢,加入纳米酶作催化剂使得反应加快。随着纳米酶加入量的增多,反应随之显著增强,体系中生成的金纳米粒子增多,加入VB4r染料分子探针,显示出较强的SERS效应。实验对几种不同纳米酶的催化SERS活性进行比较,结果显示,氧化石墨烯(GO)纳米酶催化作用最强,氧化石墨烯纳米带(GONR)和纳米二氧化硅(SiO2)次之,GDot催化活性最弱;HCG多肽和抗体与GO结合,形成多肽/抗体-GO复合物,降低了纳米酶与反应物的接触面积,使其催化作用受到抑制,其中多肽对纳米酶催化活性的抑制作用优于抗体。优化实验条件,当HCG存在时,多肽或抗体与其发生结合反应,降低了体系中游离多肽和抗体的浓度,使得未被结合的GO纳米酶浓度增多,体系催化效应活化。随着HCG浓度增大,体系反应增强生成更多的金纳米粒子,SERS信号逐渐增强。当HCG浓度在0.25-10 ng/mL范围内,其ΔI1615cm-1值与HCG浓度呈良好的线性关系,线性方程为ΔI1615cm-1=118.96C+19.51,相关系数是0.9924。据此,建立了一种多肽调控GO纳米酶催化活性SERS检测HCG的新方法。  3、适配体调控GO纳米酶催化活性SERS和RRS检测Hg2+  汞适配体(Aptamer)结合在GO表面,对GO纳米酶的催化活性具有较好的抑制作用。且适配体与Hg2+结合可形成稳定的复合物,减少了适配体与GO的结合。据此可以建立适配体调控GO纳米酶催化活性光谱检测Hg2+的方法。实验结果显示,在0.25-10nmoL/LHg2+浓度范围内,其1616cm-1处的SERS增加值与Hg2+浓度呈良好的线性关系,线性方程为ΔI1616cm-1=264.07C+101.02,相关系数是0.9849,检出限为0.08 nmoL/L;实验体系在0.5-10 nmoL/L Hg2+浓度范围内,随着Hg2+浓度增加,反应生成的金纳米粒子增多,体系共振瑞利散射光谱(RRS)随之增强,其370nm处的RRS散射峰强度增加值与Hg2+浓度呈良好的线性关系,线性方程为ΔI370nm=162.9C+111.71,相关系数是0.983,检出限为0.17 nmoL/L。本法灵敏度较高,检测快速。该方法用于实际水样的分析,结果满意。
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