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目的:本课题选取人宫颈癌SiHa细胞株,研究羟基喜树碱(HCPT)对缺氧诱导的宫颈癌SiHa细胞HIF-1α及其下游的VEGF和Glut-1基因表达的影响。并探索抑制HIF-1α蛋白对宫颈癌细胞增殖的影响,为将HIF-1作为抗宫颈癌治疗的新的分子靶点提供理论依据。方法:在缺氧条件下(37℃, 5%CO2, 1%O2饱和度)体外培养宫颈癌SiHa细胞株,经不同浓度HCPT作处理24h后,用MTT法检测HCPT对SiHa细胞增殖活性的影响,用半定量RT-PCR法和WesternBlot法分别检测不同浓度HCPT对SiHa细胞HIF-1α及其下游VEGF和Glut-1 mRNA和蛋白表达水平影响。并分别设立常氧对照组和缺氧对照组进行比较。结果: (1)常氧条件下,SiHa细胞内无HIF-1α蛋白表达,VEGF和Glut-1蛋白有较低水平表达;缺氧可在mRNA和蛋白水平诱导各组细胞VEGF和Glut1基因高表达,与常氧组比较有差异(P<0.05)。随着缺氧程度的加重,其诱导的HIF-1α蛋白和VEGF和Glut1基因表达进一步上调(P<0.05);(2)常氧条件下,HCPT处理对SiHa细胞HIF-1α、VEGF和Glut-1基因表达无影响。HCPT对缺氧细胞HIF-1α蛋白及其下游的VEGF和Glut-1 mRNA和蛋白表达有明显抑制作用(P<0.05),而对HIF-1αmRNA表达无明显抑制作用;(3) HCPT抑制SiHa细胞的增殖,其抑制率随药物浓度增加而上升。缺氧组HCPT的IC50为6.73±0.409μg/ml,常氧对照组IC50为6.51±0.713μg/ml,常氧和缺氧条件下,HCPT对SiHa细胞毒性作用没有明显差异(P>0.05)。结论:缺氧条件下,HCPT可抑制人宫颈癌SiHa细胞内HIF-1α蛋白表达,进而抑制HIF-1α下游VEGF和Glut-1基因的转录和表达。这种抑制作用与HCPT的细胞毒性作用无关,且抑制HIF-1α蛋白对宫颈癌细胞增殖无明显影响。