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理冲生髓饮是王秀霞教授以中医理论为指导总结出的中药复方制剂,在卵巢癌的治疗中疗效显著,细胞实验与动物试验也确切证明其对癌细胞具有抑制作用。但理冲生髓饮的基础研究较薄弱,药效物质基础和体内代谢过程不明确。本文拟通过高效液相色谱法、超高效液相色谱法对中药复方理冲生髓饮血清进行分析,建立理冲生髓饮血清指纹图谱,阐明入血成分,为进一步药效物质基础和体内作用机制研究奠定基础。首先,采用高效液相色谱技术,通过考察色谱条件(流动相、检测波长、柱温、流速、运行时间等)、血清处理方法、采血点,经精密度、稳定性、重复性试验建立了理冲生髓饮血清HPLC指纹图谱的分析方法,色谱条件为:仪器为Waters高效液相色谱仪及二极管阵列检测器;色谱柱为DIKMAC18色谱柱(5 μm,250 mm×4.6mm);流动相为A水,B乙腈,梯度洗脱程序为:0-10min,95%-80%A;10-45min,80%-45%A;45-60min,45%-10%A;60-80min,10%A;检测波长 210nm,柱温 30℃,进样量 10μL,流速1.0mL/min。血清处理方法为乙腈法,给药后2h采血。精密度、稳定性、重复性试验各色谱峰的相对保留时间和相对峰面积RS D均在3%以内。各批次指纹图谱的相似度均在0.9以上,共确定了 28个共有峰,其中,4号峰为人参皂苷Rg1,10 号峰为淫羊藿苷,19号峰为宝藿苷1,26号峰为β-榄香烯。然后,采用超高效液相色谱技术,通过考察色谱条件(流动相、柱温、流速、运行时间、进样量等),经精密度、稳定性、重复性试验建立了理冲生髓饮血清UPLC指纹图谱的分析方法,色谱条件为:DIKMA C18色谱柱(1.8 μm,50 mm×2.1 mm);流动相为A水,B乙腈,梯度洗脱程序为:0-2min,95%A;2-4min,95%-85%A;4-15min,85%-50%A;15-16min,50%-44%A;16-20min,44%-20%A;20-31min,20%-0%A;检测波长 210n m,柱温30℃,进样量 3μL,流速0.3mL/min。精密度、稳定性、重复性试验各色谱峰的相对保留时间和相对峰面积RSD均在3%以内。各批次指纹图谱的相似度均在0.9以上,共确定了29个共有峰,其中,3号峰为人参皂苷Rg1,7号峰为淫羊藿苷,14号峰为莪术醇,15号峰为宝藿苷I,24号峰为β-榄香烯。本文建立的理冲生髓饮血清指纹图谱方法简单快速、分离度高、重现性好,可作为理冲生髓饮药效物质基础研究的新方法。