目的:1.研究顺铂慢性给药对大鼠胸主动脉的损伤作用及机制;2.研究顺铂对血管平滑肌细胞的损伤作用及机制;3.研究顺铂对大鼠离体胸主动脉环的损伤作用及机制。方法:1.8周龄的SD雄性大鼠,体质量240-260 g,随机分成三组,生理盐水对照组（NS组,ip给予生理盐水,n=8）、顺铂2 mg/kg组（ip给予顺铂2 mg/kg,n=8）、顺铂3 mg/kg组（ip给予顺铂3 mg/kg,n=14）,每周1次,连续5周,累积剂量分别为10 mg/kg、15 mg/kg,测各组大鼠尾动脉收缩压（SBP）、舒张压（DBP）以及心率（HR）;使用10%水合氯醛（ip给予0.3 mL/100g）麻醉大鼠,腹主动脉采血处死;检测血清中MDA、SOD、NE、GC、ROS、8-OhdG、FSH和TRX含量;同时取大鼠胸主动脉,采用恒温灌流系统检测大鼠胸主动脉对ACh、PE和KCl的血管反应性;HE和Masson染色观察大鼠胸主动脉组织形态学变化;Western blot、免疫组织化学法分析PKC及亚型、TXNIP、iNOS和eNOS蛋白在大鼠胸主动脉组织中表达水平变化。2.培养大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞,分为生理盐水对照组（Control组）:给予等体积生理盐水;顺铂DDP 20μM组和顺铂30μM组,给药24 h后,收集细胞,检测细胞内ROS、MDA、SOD及NO含量的变化;Western blot检测PKC及亚型、TXNIP和iNOS蛋白在大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞中表达水平变化。3.离体大鼠胸主动脉血管环分为内皮完整孵育生理盐水组（NS+End⁺组）、去内皮孵育生理盐水组（NS+End^-组）、顺铂+血管内皮完整组（DDP+End⁺组）和顺铂+血管去内皮组（DDP+End^-组）。采用恒温灌流系统,观察各组血管环张力的变化;Western blot检测PKC及亚型、TXNIP、iNOS和eNOS蛋白在大鼠胸主动脉血管环组织中表达水平变化。结果:1.DDP长期给药降低正常SD大鼠收缩压、舒张压和胸主动脉血管反应性;2.DDP长期给药可引起SD大鼠血清中ROS、MDA、8-OhdG、FSH、GC和NE含量升高,而SOD酶活力及TRX含量降低,血清中和胸主动脉组织中NO含量均升高（P<0.01）。3.DDP长期给药可使大鼠胸主动脉管壁明显增厚,血管内膜不平滑,出现褶皱,血管平滑肌细胞增殖,且各层血管弹力纤维排列紊乱,出现血管重构;Masson染色结果显示,DDP能使大鼠胸主动脉蓝染面积明显增多,血管胶原纤维明显增生,并排列紊乱。4.DDP长期给药可使大鼠胸主动脉组织中PKC、PKCα和eNOS蛋白表达水平降低,而PKCβ₁、PKCβ₂、iNOS和TXNIP蛋白表达水平升高。5.DDP处理大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞后,NO、ROS、MDA含量升高,SOD酶活性降低,且细胞中PKC、PKCα蛋白表达降低,而PKCβ₁、PKCβ₂、iNOS和TXNIP蛋白表达增加（P<0.01）。6.DDP孵育处理大鼠离体胸主动脉血管环后,血管环对KCl和PE的血管收缩反应性降低,且大鼠离体胸主动脉血管环中PKC、PKCα和eNOS蛋白表达降低,而PKCβ₁、PKCβ₂、iNOS和TXNIP蛋白表达增加（P<0.01）。结论:1.DDP长期给药能降低胸主动脉血管反应性,且导致血管平滑肌细胞增殖,血管纤维化,血管中膜层增厚,其机制可能与DDP抑制PKC及PKCα表达,增加PKCβ₁、PKCβ₂、iNOS和TXNIP表达,导致NO过量产生,引起氧化损伤有关。2.DDP可抑制PKC及PKCα表达,增加PKCβ₁、PKCβ₂、iNOS和TXNIP表达,引起NO和ROS过量产生,导致氧化应激损伤,降低血管平滑肌细胞生存率。3.DDP孵育大鼠离体胸主动脉环,可降低血管环对KCl、PE收缩程度,其机制可能与降低大鼠离体胸主动脉血管环中PKC、PKCα和eNOS蛋白表达,增加PKCβ₁、PKCβ₂、iNOS和TXNIP蛋白表达有关。