透明丝素蛋白膜作为角膜细胞载体的研究

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蚕丝蛋白作为一种优异的天然高分子纤维蛋白已广泛应用于生物医用材料领域。其来源可靠,获取方便,具有良好的力学性能,良好的细胞相容性,组织相容性。本课题探讨了透明丝素蛋白膜作为角膜修复材料的可行性。采用酰胺类小分子与丝素蛋白复合,研究丝素蛋白复合膜的机械性能,透光性能,以及细胞相容性。通过X-射线衍射法研究了丝素蛋白复合膜的结构,结果表明当酰胺添加量较低时,复合膜主要为Silk I结晶结构,当酰胺添加量较多时,复合膜转变为Silk II结晶结构。力学性能测试表明,复合膜的断裂强度虽然比纯丝素膜有所降低,但是酰胺的加入改善了其柔韧性,使得其断裂伸长率增大。溶失率以及溶胀度测定的结果表明,酰胺的加入极大地降低了复合膜的溶失率,并且具有较低的溶胀度。采用酶标仪检测了复合膜的透光性能,并对复合膜的透光性进行了长时间的追踪检测,结果表明,酰胺/丝素蛋白膜具有较长时间的透光稳定性。提取家兔角膜基质细胞,通过在丝素蛋白膜上的体外培养,研究了酰胺/丝素蛋白复合膜与角膜基质细胞的相容性,并与乙醇处理的纯丝素蛋白膜进行对比。采用血球计数板测定细胞在不同膜上的黏附率,使用阿尔玛蓝测定细胞在不同膜上生长不同天后的荧光值,利用荧光倒置显微镜观察角膜基质细胞生长形态,Masson染色观察细胞外胶原蛋白的分泌。结果表明,酰胺/丝素膜与纯丝素膜之间并无显著差异,说明酰胺/丝素膜能够支持角膜基质细胞正常生长,酰胺/丝素复合膜有望用于角膜组织的修复。
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