多肽组学自诞生以来受到广泛的关注。多肽组学关注的是生物体内产生的具有一定功能的小分子多肽。本研究利用定量多肽组学技术研究细胞凋亡过程,并对植物生长阶段产生的多肽进行了初步研究。细胞凋亡是根据质膜的完整性定义的一种生理性的死亡,它可以保护局部的炎症反应和组织损伤。目前关于细胞凋亡与癌症发生、各种免疫性疾病之间的关系有着很多的研究。近年来已有一些基于蛋白质组学的细胞凋亡研究。为了更清楚地了解细胞凋亡过程中多肽含量的变化及这些多肽可能参与的过程或功能,我们利用定量多肽组学对凋亡过程进行了研究。本研究以Hela细胞系作为实验材料,用不同浓度的H₂O₂对其进行处理,提取凋亡过程产生的多肽并进行定量分析。主要结果如下:1.CCK-8法检测了H₂O₂对Hela细胞的毒性,发现药物对细胞的影响不仅与作用浓度和作用时间有关,还与细胞的数量有关。用不同浓度H₂O₂处理Hela细胞6小时,采用Annexin V-FITC/PI双染法定量检测细胞调亡情况。当细胞量达到3.5×107个,5 mMH₂O₂处理细胞6小时后,细胞凋亡率为40%,此时细胞多处于凋亡后期。2.比较2mM或5mMH₂O₂处理细胞6小时的定量多肽组,结果发现该凋亡过程共检测出385个多肽,这些多肽的前体蛋白中共93个表达差异显著,这93个多肽蛋白前体与蛋白质代谢、凋亡过程、细胞周期等有关。仅30个多肽是蛋白质中间片段,其他的多肽主要分布在C-端或N-端。植物活性多肽在植物的生长发育及抗病抗虫过程中发挥了重要的作用,然而目前对于植物多肽组的系统性研究尚不多见。本研究采用尿素法提取水稻中的多肽组,通过一系列的提取和纯化过程获得多肽,再利用nanoLC-MS/MS对这些多肽进行结构测定和定位分析。我们在水稻叶片和根部共鉴别出约110个多肽,通过对这些多肽进行细胞定位发现,这些多肽多分布在生命活动活跃的地方,表明这些多肽参与了水稻重要的生理活动。