本次试验采取溶剂二相沉淀法分离不同分子量的原花青素,采用分光光度法测定原花青素的平均聚合度。探讨原花青素在体外与蛋白质间的络合效应及抑制规律,在体内对正常小鼠营养素吸收及消化酶活性的影响。试验过程及结果如下：1.分离不同聚合度的葡萄籽葡萄籽原花青素采用氯仿/甲醇溶剂二相沉淀法将葡萄籽原花青素进行分级、分离。配置一定浓度的原花青素粗品水溶液,用乙酸乙酯溶剂进行反复萃取,得到乙酸乙酯相(EA组分)与水相(W组分)。之后用一定体积比的乙酸乙酯/甲苯继续反复萃取乙酸乙酯相,水溶液经浓缩、干燥处理后得到F0。W组分经浓缩、干燥后再次溶于甲醇溶液中,通过调节其与氯仿间的体积比,达到分离不同分子量原花青素(F1-F5)的目的。2.测定葡萄籽原花青素的平均聚合度经本实验证实,分光光度法与间苯三酚法相比相对误差为7.8±1.28%,两种方法间的差距较小,为了高效、快速测定原花青素的平均聚合度,本实验采用分光光度法对溶剂二相沉淀法分离出来的6个片段进行测定。用香草醛-冰乙酸法测量原花青素物质的量,香草醛-甲醇法测定原花青素质量。经测量Fo-Fs的平均聚合度分为2.36、4.46、5.54、7.15、9.12、11.63。3.葡萄籽原花青素与蛋白质间的相互作用研究分别将不同浓度、不同聚合度的原花青素溶液与一定浓度的明胶溶液在容量瓶中等量混合,研究不同含量、不同聚合度的原花青素与蛋白质间的络合效应及抑制规律。经研究发现原花青素与蛋白质之间的相互作用与原花青素含量有关。0.15 mg/mL的明胶溶液与0.05 mg/mL、 0.1 mg/mL、 0.15 mg/mL、 0.2 mg/mL、 0.25 mg/mL的原花青素溶液相互作用后,沉淀率依次为28%、47%、80%、84%、86%。此外,原花青素与蛋白质间的相互作用与原花青素的聚合度有关。聚合度分别为1、2.36、4.46、5.54、7.15、9.12、11.63的浓度为0.1 mg/mL原花青素与0.15 mg/mL的明胶相互作用后,沉淀率依次为0.05%、32%、49%、61%、72%、82%、83%。4.不同聚合度的葡萄籽原花青素在小鼠体内对营养素吸收及消化酶活性的影响采用24只雄性昆明白小鼠按照体重随机分为对照组,低聚原花青素组,高聚原花青素组,每组8只重复,进行为期56d的灌胃试验。结果发现高聚组小鼠静增体质量为8.52±1.59 g,低聚组小鼠静增体质量为10.94±0.92g,经显著性分析发现高聚组小鼠静增体质量显著低于对照组,低聚组小鼠净增体质量虽低于对照组,但差异不显著。高聚组小鼠总食物摄入量为242.22±15.04g,低聚组小鼠总食物摄入量为255.89±13.29g,经显著性分析发现试验组小鼠食物总摄入量都显著低于对照组。高聚组小鼠食物转化率为3.52±0.63%,低聚组小鼠食物转化率为4.28±0.33%,经显著性分析发现高聚组小鼠食物转化率显著低于对照组,低聚组小鼠食物转化率虽低于对照组,但差异不显著。高聚组小鼠小肠中α-淀粉酶的活性为0.20±0.03 U mgprot-1,胰腺中α-淀粉酶的活性为0.26±0.05U mgprot-1,低聚组小鼠小肠中α-淀粉酶的活性为0.27±0.06 U mgprot-1,胰腺中α-淀粉酶的活性为0.35±0.06 U mgprot-1,经显著性分析发现各试验组小鼠小肠、胰腺中α-淀粉酶活性都显著低于对照组,高聚组小鼠小肠、胰腺中a-淀粉酶活性都显著低于低聚组。高聚组小鼠小肠中蛋白酶活性为3200.25±422.29 U mgprot-1,胰腺中为3782.56±564.98 U mgprot-1,胃中为20.15±3.69U mgprot-1,低聚组小鼠小肠中蛋白酶活性为3900.31±386.49 U mgprot-1,胰腺中为4652.49±574.35 U mgprot-1,胃中为25.76±3.46 U mgprot-1,经显著性分析发现,高聚组小鼠小肠、胰腺与胃中蛋白酶活性都显著低于对照组,低聚组虽低于对照组,但差异不显著。高聚组小鼠蛋白质表观消化率为80.53±5.49%,脂肪表观消化率为82.65±3.42%,低聚组小鼠蛋白质表观消化率为84.89±2.59%,脂肪表观消化率为86.08±1.68%,经显著性分析发现高聚组小鼠蛋白质、脂肪表观消化率显著低于对照组,低聚组虽低于对照组,但差异不显著。高聚组小鼠Ca表观消化率为25.97±2.49%,Zn表观消化率为23.28±2.35%,低聚组小鼠Ca表观消化率为27.05±1.29%,Zn表观消化率为24.45±2.52%,经计算发现试验组小鼠Ca、 Zn表观消化率显著低于对照组.。总的看来高聚组与对照组相比可以显著降低小鼠净增体质量、总摄食量、食物利用率、淀粉酶活性、蛋白酶活性及主要营养素消化率,低聚组与对照组相比仅能显著降低总摄食量、α-淀粉酶活性、Ca、 Zn表观消化率。通过本研究发现,高聚原花青素对试验小鼠营养素吸收及消化酶活性的影响远大于低聚原花青素。因此在实际生活中,我们完全可以通过降低原花青素聚合度的方法来降低多酚的抗营养性。