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目的:RBM是新近发现的结构功能相似的RNA结合基序蛋白家族,可能与m RNA的剪接、翻译和稳定性有关。RBM10与RBM5是RBM的重要成员,目前研究表明,RBM10与RBM5结构相似,具有高度同源性,是潜在的肿瘤抑制基因。现有证据表明RBM5是肺腺癌的抑癌基因,可以抑制肺腺癌细胞的生长增殖。然而,RBM10是否抑制肺腺癌细胞的生长增殖尚未可知。为了研究RBM10在肺腺癌发病机制中的作用,我们搜集了41例原发肺腺癌患者的肺癌组织及癌旁正常肺组织标本(取自同一患者),采用RT-PCR和Western blot方法分别观察RBM10在肺腺癌组织中m RNA及蛋白的表达情况,同时分析其表达水平与肺腺癌患者临床病理特点的相关性。同时通过体外实验进一步观察重组慢病毒感染肺腺癌A549及H1299细胞株,观察稳定RBM10过表达对肺腺癌细胞增殖和细胞周期的影响,目的为明确RBM10在肺腺癌发病中作用的分子机制,为探寻肺癌治疗新靶点及分子靶向治疗奠定基础。研究方法:1.采用半定量RT-PCR及Western blot方法分别检测41例人肺腺癌组织RBM10 m RNA及蛋白的表达情况,统计分析RBM10的蛋白表达水平和临床病理特点(包括性别、年龄、吸烟史、淋巴结转移、肺癌TMN分期)的相关性。2.将重组慢病毒同时感染两种肺腺癌A549及H1299细胞株,获得稳定RBM10过表达细胞株。3.采用细胞增殖实验(MTT)检测稳定RBM10过表达对A549及H1299细胞株增殖的影响。4.采用细胞克隆实验检测稳定RBM10过表达对A549及H1299细胞株克隆形成能力的影响。5.通过流式细胞仪检测稳定RBM10过表达对A549和H1299细胞生长周期的影响。结果:(1)与癌旁组织相比,RBM10 m RNA和蛋白在肺腺癌组织中表达水平显著降低,甚至缺失,差异具有统计学意义(P<0.05)。RBM10蛋白在人肺腺癌组织中表达水平与患者年龄、性别、吸烟史及淋巴结转移等临床病理指标无相关性;而与TNM分期呈负相关(P<0.05)。(2)成功构建了稳定RBM10过表达的A549和H1299细胞株。(3)MTT结果表明稳定RBM10过表达显著抑制A549和H1299细胞株增殖。(4)细胞克隆实验表明稳定RBM10过表达显著抑制A549和H1299细胞株克隆形成能力。(5)细胞周期实验表明稳定RBM10过表达可使A549细胞周期阻滞于G0/G1期,而H1299细胞周期阻滞于S期。结论:(1)RBM10在人肺腺癌癌组织中表达下调,与肺腺癌组织的TNM分期呈负相关,提示RBM10缺失可能参与肺腺癌的发生、发展等过程。(2)利用稳定RBM10过表达的体外A549和H1299细胞株模型,发现稳定RBM10过表达抑制肺腺癌细胞生长,使肺腺癌细胞的克隆形成能力减弱,细胞周期阻滞。提示RBM10表达上调抑制肺腺癌生长。