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新城疫病毒是一种高度传播性的病原,感染家禽后会引起很高的发病率和死亡率。目前阻止和控制新城疫快速传播的主要方法是接种疫苗,但仅使用疫苗不能发挥很好的效果,免疫增强剂的联用可以使疫苗产生更好的免疫应答,使疫苗提供更长时间的保护。本试验的目的是筛选出枯草菌肽可溶粉（KSP）提高鸡新城疫抗体水平时的适宜剂量,探索枯草菌肽提高鸡新城疫疫苗免疫效果的作用机制。通过两个批次的剂量筛选试验筛选出枯草菌肽可溶粉提高鸡新城疫抗体水平时的适宜剂量和其对生长性能的影响。第一个批次试验分为油苗组（IVG）、活苗组（LVG）、油苗和活苗联用组（CVG）的三种不同免疫类型组;每个不同免疫类型组又分了高(500mgL-1)、中(100mgL-1)、低(20mgL-1)三个剂量组和一个对照组（VC）,自由饮水给药,连续用药10天,通过血凝抑制试验（HI）测定鸡新城疫抗体水平。在第二批次试验中,试验鸡随机分成10组,除空白对照组（BC）外,其余9组在11日龄免疫新城疫疫苗,并在25日龄再次免疫新城疫疫苗（不包括空白对照组和单次免疫用药组）。在11、18、25、32、39和43日龄,测定新城疫抗体水平和生长性能。通过体外试验和体内试验探索枯草菌肽可溶粉提高鸡新城疫疫苗免疫效果及其作用机制。在体外试验中,使用MTT方法测定KSP对T淋巴细胞和B淋巴细胞增殖的影响;在体内试验中,450只14日龄的鸡随机分为七组,除去空白对照组,各组在14日龄免疫新城疫疫苗,在28日龄再次免疫（除去空白对照组）,在第一次免疫的同时,KSP高剂量组(KSPH,100mgL-1)、KSP中剂量组(KSPM,50mgL-1)、KSP低剂量组(KSPL,25mgL-1)和紫锥菊口服液对照组(EOL,1.5mgL-1)、无关肽对照组(PSC,100mgL-1)通过自由饮水给药,均连用10天;免疫对照组（VC）和空白对照组（BC）中的试验鸡饮用自来水作阴性对照。在14、21、28、35、42日龄时,血清学方法测定试验鸡的抗体滴度;在13、24、39日龄时,用MTT法测定T淋巴细胞和B淋巴细胞的增殖,采用流式细胞仪测定T淋巴细胞亚群变化的情况;在14、21、36、43日龄时,用ELISA法检测试验鸡血清中的细胞因子（IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ）的含量;在25和40日龄时,用中性红摄入法测定试验鸡腹腔巨噬细胞的吞噬功能和用称重法测定试验鸡的免疫器官指数。1、第一批次剂量筛选试验结果表明:KSP合适的剂量范围在20mgL-1左右,而且使用油苗和活苗联用的效果最好,但都对试验鸡的生长性能没有明显的影响。第二批次剂量筛选试验结果表明:KSP在最高浓度2500mgL-1时,对新城疫抗体水平有明显的免疫抑制作用;KSP的浓度50mgL-1时,新城疫抗体滴度在多数情况下都显著高于对照组（p<0.05）,用药两次和用药一次差异不显著（P>0.05）,这表明KSP在合适浓度可以显著提高新城疫疫苗的免疫效果,但都未能改善肉鸡的生长性能。2、正式试验的体外试验结果表明:在T淋巴细胞分裂原ConA的协助下,KSP浓度为62.5–1000μg ml-1时测得的A570值显著高于KSP浓度为0时的A570值,说明KSP可以显著刺激T淋巴细胞增殖（p<0.05）;在B淋巴细胞分裂原LPS的协助下,KSP浓度为15.63–1000μg ml-1时测得的OD值显著高于KSP浓度为0时的A570值,说明KSP可以显著刺激B淋巴细胞增殖（p<0.05）,且KSP浓度均为1000μg ml-1时效果最好。3、在正式试验的体内试验中:新城疫抗体测定结果表明,除14日龄外,KSPH、KSPM和KSPL组试验鸡的抗体滴度在其余各检测时间点均显著高于对照组（p<0.05）,KSPH和KSPM组试验鸡的抗体滴度显著高于无关肽（PSC）对照组（p<0.05）;T淋巴细胞增殖试验检测结果表明,不同日龄各组样品的A570值无显著差异（P>0.05）;B淋巴细胞增殖试验检测结果表明,在试验鸡24日龄时KSPH和KSPM组样品的A570值显著高于对照组（p<0.05）,在试验鸡39日龄时KSPH、KSPM和KSPL组样品的A570值显著高于对照组（p<0.05）;T淋巴亚群检测检测结果表明,不同日龄各组样品的CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞、CD4+/CD8+的比值差异不显著（P>0.05）;细胞因子（IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ）检测结果表明,除试验鸡36日龄时KSPH和KSPM组血清样品中IL-4的含量显著高于对照组外,其余不同日龄的各组样品中IL-2、IL-10和IFN-γ的含量差异不显著（P>0.05）;腹腔巨噬细胞吞噬能力检测结果表明,在25日龄时KSPH、KSPM和KSPL组试验鸡的A570值显著高于对照组（p<0.05）,在39日龄时KSPH和KSPM组试验鸡的鸡的A570值显著高于对照组（p<0.05）;免疫器官指数检测结果表明,在25日龄时KSPH和KSPM组试验鸡的脾脏指数和法氏囊指数显著高于对照组（p<0.05）,KSPH、KSPM和KSPL组试验鸡的胸腺指数显著高于KSPL组和对照组（p<0.05）;在39日龄时KSPH和KSPM组试验鸡的脾脏指数显著高于VC组（p<0.05）,各组的法氏囊指数和胸腺指数差异不显著（P>0.05）。本次研究不仅筛选出了枯草菌肽可溶粉提高鸡新城疫抗体水平时的合适剂量为50mgL-1,也论证了枯草菌肽可溶粉是通过增加试验鸡血清中抗体滴度、促进淋巴细胞增殖、提高吞噬细胞活性和免疫器官指数等途径增强新城疫疫苗免疫效果,表明其可以成为一种新型的免疫增强剂。