目的:观察新生7日龄高胆红素血症大鼠海马区神经元Tau、p-Tau表达与其凋亡情况,分析Tau、p-Tau蛋白表达与神经元凋亡相关性,探讨Tau、p-Tau在高胆红素血症所致脑损伤中的可能发病机制,进而为Tau、p-Tau在新生儿高胆红素血症所致脑损伤中的早期临床诊断方面提供一定理论基础。方法:采用腹腔注射胆红素溶液造模。根据随机数字表法,随机选取7日龄SD大鼠144只,平均分为3个大组,即对照组(C组,腹腔注射等体积生理盐水0.025 ml/g)和实验组(T1组,腹腔注射胆红素溶液100μg/g,浓度为4mg/ml;T2组,腹腔注射胆红素溶液150μg/g,浓度为6mg/ml),根据造模后处死时间点不同(2h、6 h、12h、24 h、48 h和72 h)每组分6个亚组,各8只。观察不同时间点新生大鼠异常行为,断头取脑切片,HE染色法观察海马区的病理改变,免疫组化法测Tau、p-Tau表达,TUNEL法检测细胞凋亡。采用Grahphad Prism 8.0软件进行多因素方差分析及相关性分析,检验水准为0.05。结果:(1)神经学表现:C组大鼠各时间点反应良好,无异常;T1组造模后2h未见明显异常行为,造模后6h-24h,部分大鼠出现嗜睡,活动力低下,反应迟钝;至造模后72h,记录到2只大鼠出现间歇性尖叫、抽搐;T2组大鼠造模后上述各时间点异常行为较T1组明显,至造模后72h,记录到5只大鼠出现间歇性尖叫、抽搐。造模开始至处死前,无模型大鼠死亡。(2)苏木精-伊红染色(HE染色)示:C组不同时间点海马区神经元细胞排列规整,高倍镜下细胞核大而圆、透明。实验组造模后2h海马区神经元细胞排列较整齐,细胞未肿胀、无皱缩,细胞核未见异常;6 h神经元细胞排列基本整齐,细胞略皱缩,核稍有偏位;12 h神经元细胞排列出现紊乱,细胞体积皱缩,数量略有减少,核深染、偏位,少数神经元出现肿胀、淡染,出现凋亡小体;24h-72h细胞排列进一步紊乱,数目进行性减少,核固缩、裂解加重,空泡增多,凋亡小体增多,T2组较T1组明显。(3)Tau蛋白:用免疫组化方法测定大鼠海马区神经元Tau蛋白表达,肉眼可见阳性表达时神经元细胞的胞质、轴丘及轴突处出现棕黄色颗粒沉积,光学扫描软件分析得,与C组相比,T1组阳性表达6h开始升高,24h表达最明显,随后出现下降,但仍高于C组。T2组阳性表达高于T1组。(4)p-Tau蛋白:用免疫组化方法测定大鼠海马区神经元p-Tau蛋白表达。p-Tau为Tau蛋白磷酸化状态,肉眼可见阳性表达时神经元胞质、轴丘、轴突处染成棕黄色,神经纤维增粗,部分神经纤维发生缠结。光学扫描软件分析其表达趋势与Tau蛋白相近,且T2组阳性表达高于T1组。(5)TUNEL法:显色后凋亡细胞呈棕褐色圆形颗粒。实验组细胞凋亡率随造模时间延长而升高,且T2组高于T1组,C组神经元细胞凋亡率无明显变化。(6)多因素方差分析结果显示,在分别对7日龄新生高胆红素血症大鼠海马区神经元细胞Tau、p-Tau表达及细胞凋亡率的检测中发现,时间效应、组间效应及交互效应均有统计学差异(P均<0.05)。相关性分析显示,在实验组6h至24h,Tau与p-Tau蛋白(r=0.9677,P<0.05),Tau与神经元凋亡率(r=0.5928,P<0.05),p-Tau与神经元凋亡率三者间表达存在线性正相关(r=0.5242,P<0.05)。结论:过度表达的Tau、p-Tau参与了早期新生儿高胆红素血症所致脑损伤的发展。据此可推测,Tau、p-Tau蛋白可作为早期诊断和治疗新生儿胆红素脑病的生化参考指标之一。