纳米材料固定化酶体系的构筑及其在电化学传感器中的应用

被引量 : 14次 | 上传用户:cf1987821
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本文通过两种途径以克服酶的纯化、分离过程复杂,成本昂贵,长期稳定性差,与底物以及产物不易分离,无法重复利用等缺陷。一是通过酶固定化方法,改善酶的稳定性及重复利用性。为此,本文选用纳米氧化锌(ZnO)和化学还原氧化石墨烯(CRGO)为酶固定化载体材料,构建了两种新型的纳米材料固定化酶体系。研究了所构筑的固定化酶体系中纳米材料与酶的作用机理以及材料对固定化酶催化性质和物理化学性质的影响。同时,利用纳米材料固定化酶制备出了电化学生物传感器。另一途径是设计并制备生物酶模拟物。该论文的具体研究内容及主要结果如下:(1)不同形貌的ZnO纳米材料用于酶的固定化体系的构筑。通过调节水热法制备过程中溶剂甲醇与水的比例,可控合成出了不同形貌的ZnO纳米颗粒,包括纳米球、纳米片、纳米多枝杈等。利用3-氨基丙基三乙氧基硅烷(APTES)和正硅烷(TEOS)对ZnO纳米材料表面进行了氨基功能化修饰。以戊二醛为交联剂,成功地将辣根过氧化物酶(HRP)通过化学键合的方法固在于氨基化的纳米ZnO材料表面。同时,研究了ZnO纳米粒子形貌对HRP固载的影响,发现三种不同形貌纳米ZnO材料达到最大酶固载量时所用戊二醛的量不同;HRP固载量以及固定化酶动力学参数也因载体材料形貌的不同而有差别;纳米材料的形貌对酶的固载量以及固定化酶的动力学参数都有着重要的影响。(2)氧化石墨烯/化学还原氧化石墨烯固载酶体系构筑。系统研究了HRP以及草酸氧化酶(OxOx)与氧化石墨烯(GO)及化学还原氧化石墨烯(CRGO)的相互作用,发现通过物理吸附,HRP和草酸氧化酶(OxOx)可成功固载于GO或CRGO表面,HRP和OxOx的固载量随着GO的还原程度的增加而增大。同时发现CRGO的酶固载量与溶液pH值无关,但受溶液中盐离子浓度的影响较大,盐离子浓度越大,酶的固载量越大,表明疏水作用是酶与CRGO结合的主要作用力。与GO固定化酶相比,CRGO固定化酶具有较好好的催化活性和重复利用性。特别是OxOx,固定化后的酶活升高至游离酶的1.4倍。(3)基于CRGO固定化酶的电化学传感器。由于CRGO具有良好的电学性质和大的比表面积,CRGO固定化酶可作为电化学电极修饰材料以制备相应的电化学传感器。本文利用CRGO固定化OxOx酶修饰玻碳电极后,发现在电化学循环伏安曲线上可以明显观测到OxOx催化草酸分解的特征峰,且随着草酸浓度的增加,特征峰电流不断增大。当采用OxOx固载量为5mg/mg,CRGO的覆盖量为0.6μg制备所谓酶电极时,对0.01-1.0mM区间范围内的草酸分解都具有很好的线性响应,较高的灵敏性和低的检测下限。(4)基于石墨烯量子点的生物酶模拟物。由于其完整的二维平面骨架结构和较多的羧基,石墨烯量子点(GQDs)具有良好的模拟过氧化物酶的催化活性。利用GQDs边缘富含的羧基,本文将GQDs通过化学键键合的方法结合于Au电极表面。GQDs修饰后的Au电极保留了GQDs对H2O2的催化活性。以GQDs/Au电极为基础构建的H2O2电化学传感器具有较宽的检测线性范围,低的检测下限,良好的稳定性和重复利用性,已被用于检测活细胞释放的H2O2浓度。
其他文献
数据是数字经济时代的生产资料,是驱动企业发展的关键要素。设备运行、环境变化等动态数据的实时采集是企业在进行数字化转型过程中的实际难题。无线传输技术以其应用的简便性和灵活性受到广泛青睐。但现有的无线技术例如NB-IoT、LoRaWAN等聚焦于低频次的应用,无法满足部分工业现场动态数据高频次、低时延的采集需求。作者对适用于工业互联网的高频次、低时延的窄带无线传输技术进行了研究,并将此技术应用于轴承SP
<正>第一部分:学情分析。本次教学是受市教研室指派,送教下乡,在农村中学上的一节语文研讨课。农村中学缺乏先进电教设备,所以无法使用课件直观呈现形象,但农村学生都有与蝈
目的通过对奥林帕斯2700全自动生化分析仪和东芝120全自动生化分析仪进行方法比对,探讨不同仪器间肝功能系列:谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、Y-谷氨酰
随着“一带一路”的深入推进,中缅经济走廊建设取得了显著成效,中国企业赴缅投资规模不断扩大,投资领域逐渐深化。然而由于缅甸的政局及政策法律环境不稳定、基础设施相对落
<正>自我管理是管理别人的重要前提,其重要性无需多言,下面两句经典名言就足以说明。孔子说:"其身正,不令而行;其身不正,虽令不从。"列宁说:"榜样的力量是无穷的。"拜读了朱
研究了从植物乳杆菌RS2 2中提取胞内乳酸脱氢酶的工艺过程,探讨了超声破碎时菌体质量浓度、处理量及处理时间对破碎效果的影响;对酶的提取工艺研究表明,0.05mol/L磷酸缓冲液(
<正>【片段】师:在这场"生死大营救"中,有一只斑羚起了最关键的作用,它是谁呢?生(齐):镰刀头羊。师:对。那么课文反复写了它哪方面的表现?分别出现在哪几段?生:反复写了它的
成像测井是在井下采用阵列传感器扫描测量,通过二维成像显示井壁地层信息的新一代测井技术。近年来,成像测井在复杂油气储层等地质解释评价中发挥着越来越重要的作用,成为现在研
安徽金寨沙坪沟斑岩钼矿床位于秦岭-大别山造山带东部的北淮阳成矿带,矿区内广泛出露燕山期侵入岩。本文对区内侵入岩进行了详细的野外调查以及系统的岩相学观察,通过锆石U-Pb
石涛的绘画美学思想时刻影响着后来的艺术创作者。他曾有言“我之为我,自有我在。古之须眉不能生我之面目,古之肺腑不能入我之腹肠。我自发我之肺肠,揭我之须眉”。艺术创作是为