【摘 要】
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七鳃鳗作为最原始的无颌类脊椎动物的代表，是一种重要的海洋模式动物。其独特的以可变淋巴受体（VLR）为核心的适应性免疫系统被认为对于揭示适应性免疫的起源与进化具有重要意义。免疫细胞间的通讯是协调有效免疫应答的核心特征，然而七鳃鳗是否具备这一机制尚不明确。大量研究表明，细胞可通过释放细胞外囊泡（extracellμlar vesicles，EVs），尤其是外泌体（exosomes）进行细胞间信息传递。
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七鳃鳗作为最原始的无颌类脊椎动物的代表，是一种重要的海洋模式动物。其独特的以可变淋巴受体（VLR）为核心的适应性免疫系统被认为对于揭示适应性免疫的起源与进化具有重要意义。免疫细胞间的通讯是协调有效免疫应答的核心特征，然而七鳃鳗是否具备这一机制尚不明确。大量研究表明，细胞可通过释放细胞外囊泡（extracellμlar vesicles，EVs），尤其是外泌体（exosomes）进行细胞间信息传递。此前发现，七鳃鳗神经轴上髓小体细胞（SMB细胞）能够释放携带细胞因子TGF-β同源蛋白的外泌体。转化生长因子β（transforming growth factorβ,TGF-β)是转化生长因子超家族的成员之一，以同源二聚体或异源二聚体的形式分泌至细胞外。TGF-β在细胞增殖和分化，伤口愈合和免疫应答等过程中发挥关键的调控作用。目前对于TGF-β的研究主要集中于高等脊椎动物，对于TGF-β在七鳃鳗免疫调控中功能的探究仍为空白。
本研究以日本七鳃鳗L-TGF-β分子为切入点，首先通过实时定量PCR分析了其在免疫刺激前后七鳃鳗各组织中的差异表达规律。发现在七鳃鳗的心、鳃、口腔腺等组织中L-TGF-β转录水平较高。而通过注射脂多糖激活适应性免疫应答后，L-TGF-β基因在肠组织中的表达显著上调，在髓组织及白细胞中的表达有上调趋势，在其他组织中显著下调。利用ELISA实验进一步发现脂多糖刺激髓细胞后，其分泌至细胞上清中的L-TGF-β总含量与对照相比显著降低。其次，原核表达了L-TGF-β成熟肽，并进一步通过BrdU掺入实验，分析了rL-TGF-β对脂多糖激活前后髓细胞增殖的影响，发现L-TGF-β对髓细胞增殖发挥双向性调控作用，即促进静息状态下髓细胞的增殖，但抑制免疫激活后的髓细胞增殖。重要的是，进一步发现髓细胞释放的外泌体能够被其自身所摄取，并同样双向性的调控髓细胞增殖，进而验证了外泌体对髓细胞增殖的调控功能依赖于其携带的L-TGF-β分子。
总之，我们的研究结果对于揭示外泌体在七鳃鳗免疫细胞互作中发挥的信息载体功能具有重要意义，并有助于阐明外泌体以及细胞因子TGF-β功能的演化，为进一步阐明七鳃鳗适应性免疫系统中的调控机制奠定理论基础。
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