嗜酸性粒细胞对荷B16F10黑色素瘤小鼠肿瘤生长及免疫功能的影响

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目的:嗜酸性粒细胞(eosinophils,EOS)是一类起源于骨髓干细胞,并且在骨髓内分化成熟,参与抗寄生虫感染和超敏反应的重要细胞。而近年的许多研究报道嗜酸性粒细胞在多种肿瘤组织中浸润,这种在肿瘤组织中浸润的嗜酸性粒细胞具有抗肿瘤作用。因此,本实验通过建立黑色素瘤小鼠模型,肿瘤局部注射嗜酸性粒细胞趋化因子,趋化嗜酸性粒细胞到达肿瘤组织,观察小鼠淋巴细胞功能、肿瘤组织超微结构、血清及肿瘤组织中细胞因子(TNF-α和IL-10)的变化,探讨嗜酸性粒细胞和肿瘤之间的相互关系。方法:建立BALB/c小鼠黑色素瘤模型,实验分嗜酸性粒细胞组(右侧腋下种瘤部位局部注射嗜酸性粒细胞趋化因子0.1 ml(100ng/ml),隔天注射一次,共7次)、模型对照组(右侧腋下种瘤部位局部注射等量生理盐水,隔天注射一次,共7次)及空白对照组(右侧腋下皮下注射等量生理盐水),第16天处死小鼠:(1)取肿瘤组织HE染色,及电镜观察肿瘤组织超微结构的变化:(2)MTT法测小鼠T、B淋巴细胞增殖活性及NK细胞杀伤功能;(3)放射免疫法检测小鼠血清以及肿瘤组织匀浆中TNF-α和IL-10的含量。结果:1.与模型对照组比较(瘤量平均为1.152±0.086g),嗜酸性粒细胞组肿瘤生长缓慢(瘤量平均为1.122±0.063g),但无统计学意义(P>0.05)。2.MTT结果显示:与空白对照组比较,嗜酸性粒细胞组T、B淋巴细胞刺激指数明显升高(P<0.05),但与模型对照组比较,T、B淋巴细胞增殖活性无统计学差异(P>0.05)。NK细胞活性测定结果显示:与空白对照组比较,嗜酸性粒细胞组NK细胞的杀伤率(32.7%)有统计学差异(P<0.05),但与模型对照组比较,NK细胞的杀伤率差异无统计学意义(P>0.05)。3.HE染色显示:模型对照组镜下观察瘤组织大量浸润于肌肉、脂肪等组织中,坏死组织少,大量炎症细胞浸润。而嗜酸性粒细胞组镜下观察到瘤组织浸润于肌肉、脂肪等组织中,同时在肿瘤组织中可见到片状坏死组织及大量炎症细胞、嗜酸性粒细胞浸润。4.电镜结果显示:两组肿瘤细胞均有不同程度的凋亡,肿瘤细胞线粒体嵴模糊或消失,嗜酸性粒细胞组肿瘤细胞超微结构未见明显改变。5.放免法结果显示:与模型对照组比较,嗜酸性粒细胞组小鼠血清TNF-α、IL-10含量无明显差异(P>0.05),而瘤组织匀浆TNF-α、IL-10含量明显升高(P<0.05),分别为9.887±0.285ng/ml、89.7±4.62ng/ml。结论:1.嗜酸性粒细胞对荷B16F10黑色素瘤小鼠肿瘤生长无明显抑制作用。2.嗜酸性粒细胞对荷B16F10黑色素瘤小鼠T、B淋巴细胞、NK细胞活性无明显影响。
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