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随着科技的进步和社会的发展,水环境受到多种重金属离子的污染,致使水生生物的生存受到严重的威胁。重金属进入土壤和水环境后,可以通过植物和水生生物进入生物体,然后经过食物链逐级放大,导致生物体多器官系统的损伤,具有致癌、致畸和致突变的作用,给环境和生物界带来巨大的危害,因而备受广大研究者的关注,就重金属对生物体危害机理的研究也日益成为新的研究热点。在众多环境污染物中,铅(Pb)的污染尤为突出,Pb也是水体中常见的金属污染物,对各种水生生物均有不同程度的毒性。本实验采用急性毒性方法,研究了不同浓度的铅(Pb2+)对河南华溪蟹(Sinopotamon henanense)血淋巴细胞的影响。分别在光学显微镜下,采用常规法涂片,计数板计数,对河南华溪蟹血淋巴细胞进行计数,观察及分类统计。河南华溪蟹的血淋巴细胞可以分为三类:大颗粒细胞(LGH)、小颗粒细胞(SGH)和无颗粒细胞(AH)。通过Pb2+对溪蟹的急性毒性实验,用概率单位法求得96h的LC50为294mg/L。其次,根据LC50的1/32、1/16、1/8分别设置Pb2+染毒浓度为9.188、18.375和36.75mg/L,同时设对照组。铅染毒后血淋巴细胞虽然细胞的种类不变,但这三种细胞在总的循环血细胞中所占的比例发生了显著的变化。大颗粒细胞和无颗粒细胞增加,小颗粒细胞减少。同时损伤的血细胞数量随着铅浓度的升高逐渐增加。随着染毒时间的延长,总血细胞的密度显著下降。实验结果显示,用不同浓度铅染毒后,血淋巴细胞SOD、CAT酶活力较对照组差异显著,浓度为18.375mg/L显著升高,而在36.75mg/L时显著降低。同时本实验采用单细胞凝胶电泳(SCGE)技术,利用CASP软件检测并分析了铅(Pb2+)染毒引起的河南华溪蟹(Sinopotamon henanense)血淋巴细胞DNA损伤。结果表明,随着Pb2+浓度的增加和处理时问的延长,在本实验浓度范围内,Pb2+对溪蟹血淋巴细胞DNA损伤呈现逐渐增强的趋势,彗星图像拖尾程度增加,尾长、尾部DNA含量和Olive尾距都有显著增加。表明Pb2+对溪蟹血淋巴细胞DNA造成损伤;单细胞凝胶电泳技术可以灵敏地检测Pb2+对水生生物的DNA损伤。本研究旨在为重金属染毒性机制研究提供理论支持,通过对甲壳动物毒理研究为重金属致病机制研究提供实验支持。本论文对血淋巴细胞的研究为溪蟹免疫防御和对金属的解毒机理提供理论支持;为阐明铅对主要组织器官的毒性作用提供理论支持。并可为水质监测、水产养殖等领域提供科学依据和理论基础。