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【目的】检测LHX6基因两组转录本LHX6-A和LHX6-B在59例宫颈癌组织和21例正常宫颈上皮中的表达情况,研究两组转录本表达水平的高低对宫颈癌细胞系生物学行为的影响,并对可能的作用机制进行初步探讨。【方法】1.根据LHX6转录本中是否含有12号外显子将LHX6各转录本分为LHX6-A组(不含12号外显子)和LHX6-B组(含有12号外显子)两组,LHX6所有转录本简称为LHX6-all;2.实时荧光定量PCR检测两组转录本LHX6-A和LHX6-B在宫颈癌组织和正常宫颈上皮组织中的表达水平;3.使用RNAi慢病毒干扰技术在宫颈癌细胞系Hela和Caski中分别下调LHX6-A、LHX6-B和LHX6-all,构建稳转细胞株;4.CCK8实验、EDU实验、细胞克隆形成实验、凋亡实验检测下调LHX6-A、LHX6-B和LHX6-all后对Hela和Caski细胞活力、增殖以及凋亡等生物学行为的影响;5.转录组测序检测下调转录组LHX6-B后相关基因及通路的改变情况。【结果】1.在mRNA水平,LHX6-A组在正常宫颈上皮中不表达,在宫颈癌组织中的阳性率为49.15%;LHX6-B组在正常宫颈上皮和宫颈癌组织标本中均有表达,但在癌组织中的表达水平较在正常宫颈上皮的水平高;在宫颈癌组织中LHX6-B组表达水平较LHX6-A组高,LHX6-B组是LHX6基因的主要组成成分。2.下调转录本LHX6-A组后,Hela和Caski细胞的活力、增殖和凋亡率未发生变化;下调转录本LHX6-B和LHX6-all组后,Hela和Caski细胞的活力降低、增殖变慢、凋亡率增加。3.转录组测序结果提示:相对于对照组,在实验组LHX6-B中,差异倍数大于两倍且具有统计学意义的差异基因共有725个,其中表达增高的基因有527个,下降的基因有198个。功能富集分析提示差异基因参与多个与癌症相关的通路,主要的有PI3K-AKT信号通路、Ras信号通路、MAPK信号通路等。这些数据进一步提示了转录组LHX6-B可能通过影响几条重要的肿瘤相关通路来发挥其促癌作用。【结论】转录组LHX6-A和LHX6-B两组在宫颈癌组织的表达水平均升高,但两者在宫颈癌组织和正常宫颈上皮中的表达模式不同,且在宫颈癌组织中LHX6-B是LHX6基因的主要组成成分。在宫颈癌细胞系中下调LHX6基因后使细胞活力降低、增殖变慢、凋亡率增加,且这一作用主要是通过下调转录本LHX6-B组来发挥,下调LHX6-A组对细胞的增殖和凋亡无明显影响。转录组测序结果提示LHX6-B可能通过影响PI3K-AKT信号通路、Ras信号通路、MAPK信号通路等来发挥其促癌作用。