【背景】　　心力衰竭是各种心血管循环系统病理改变的代偿阶段向失代偿发展的一系列复杂临床综合症。以收缩舒张功能降低或充盈受限为主要表现的心脏泵血功能下降，心排血量减少，组织器官灌流不足，各系统代谢的需能不足，晚期合并肺循环及体循环静脉淤血。心脏压力高负荷是心力衰竭的病因之一，高血压、主动脉狭窄、肺动脉高压、肺动脉瓣狭窄等左、右心室收缩期射血阻力增加均使压力负荷异常增高。心衰起始点一旦长期激活，尽管没新心肌坏死，其过程亦难以逆转与终止，进程速度存差异，预后不良。我国曾随机抽样调查35~74岁城乡居民15518人示：心力衰竭患病率为0.9％；心衰的患病率随着年龄增高显著上升，过去的40年中，心衰致死上升6倍。目前对于心力衰竭的治疗主要是阻断神经体液路径、减轻相应症状等，所有方法均无法延缓或阻断心衰的进程。　　白藜芦醇是一种天然多酚类物质，对心血管系统有明显的保护作用。实验研究结果表明，白藜芦醇可有效地提高心肌细胞收缩、舒张功能以及心脏泵血能力，但相关机理还很不清楚。本实验集中研究压力负荷心衰大鼠模型中白藜芦醇对心衰发展向失代偿过程的延缓与阻止作用评估，同时从心肌收缩耦联相关钙调控蛋白表达出发，通过在体实验探讨白藜芦醇在压力负荷所致心衰中对相关钙信号机制作用，目前还未见相关研究报道。　　第一部分白藜芦醇对压力负荷大鼠模型心脏结构与功能的影响　　1.1研究目的　　建立压力负荷性心衰大鼠模型，观察一定浓度白藜芦醇对心脏结构以及收缩功能的影响作用；评价白藜芦醇在压力负荷大鼠模型各时间段作用维持；初步探讨白藜芦醇能否延缓或阻止心肌向心性肥大向离心性肥大即代偿阶段向失代偿阶段转变；为研究白藜芦醇延缓压力负荷心衰发展提供在替治疗效应评价依，同时也为心衰的预防和治疗提供新的理论依据。　　1.2研究方法　　1.2.1予90±10mg大鼠缩窄腹主动脉（位置：前肠系膜动脉分支与腹腔动脉之间），4周时彩色多普勒超声验证建立大鼠压力超负荷性心肌肥厚模型。　　1.2.2随机分组：假手术组（SHAM）、手术组（BAND）、干预组（BANDTREATED）　　1.2.3术后四周始干预组给予白藜芦醇（4mg/kg/d）治疗4周、6周与8周，SHAM组、BAND组予等体积生理盐水。　　1.2.4用彩色超声检测仪无创测量各组治疗4周、6周、8周左室室壁厚度、室腔直径以及射血功能等相关指标。　　1.2.5各组各时间段取大鼠心脏统计重量指数、石蜡切片HE染色及Masson染色，统计组织细胞结构形态改变，以及通过透视电镜记录各组大鼠心肌超微结构的变化。　　1.3研究结果　　1.3.1心肌细胞面积与细胞直径：与SHAM组对比，8周、10周与12周的大鼠中（分别处理了4周、6周与8周），BAND组均显著性增加（P<0.01）,BANDTREATED组在8、12周显著性增加（P<0.01)，在10周时无统计学差异。与BAND组对比中，BANDTREATED组在8周与10周时均明显降低（P<0.01），在12周面积与直径基本与BAND组一致，无统计学差异。　　1.3.2左室腔直径中：在8周、10周与12周，BAND组均较SHAM明显增高，具有统计学意义（P<0.01）,与BAND组比较中，BANDTREATED显著下降（P<0.01），与SHAM组无统计学差异。　　1.3.3心肌组织纤维化比例：在8周、10周、12周，BAND组比例较SHAM组显著增高，P<0.01；同时，BANDTREATED组较BAND组比例明显下降，差异具有统计学意义，与SHAM组比较无统计学差异。　　1.3.4心脏指数：与SHAM组比较，BAND组在各时间段的LV/BW显著增高（8周时P<0.05,10周、12周时P<0.01）;与BAND组比较，BANDTREATED组在10周与12周均显著下降（P<0.01），在8周比较中两组无统计学差异；在HW/BW值，SHAM与BAND组在10周时有统计学差异（P<0.05），余时间中未见显著差异。BANDTREATED组较BAND组在8周、10周显著下降（P<0.05），在12周无显著差异。　　1.3.5透视电镜中示：SHAM组肌横纹清晰，线粒体无肿胀，BAND组横纹肌大部分断裂，线粒体肥大、肿大、破裂，可见自噬体，超微结构排列不清，BANDTREATED中横纹肌排列较BAND组整齐，断裂情况明显改善，线粒体依然肿胀明显，未见明显裂解，肌横纹间肌浆网较SHAM肿胀。　　1.3.6心脏M型超生：与SHAM组相比，BAND组在8周、10周与12周的EF、FS、Vmax显著下降(P<0.01,12周FS中P<0.05)，BANDTREATED组12周的FS与Vmax明显上升，差异具有统计学意义（P<0.05），余时间段指标与SHAM组无统计学差异。与BAND组相比，BANDTREATED组在各时间段均显著性增高(P<0.01)。　　1.3.7室腔LVIDs与LVIDd在B超中显示：在8周中三组间比较无统计学差异，10周与12周中各组间开始存在统计学意义。与SHAM相比，BAND组LVIDs与LVIDd显著增高（P<0.01,12周LVIDs中P<0.05），与BANDTREATED间比较未见统计学差异。与BAND相比，BANDTREATED组中LVIDs与LVIDd在10周与12周显著下降（P<0.01）。　　1.3.8室壁IVSDd、IVSDs、LVPWd与LVPWs示：IVSDd在8周与10周中各组无统计学意义，12周中与SHAM组比较中，BAND与BANDTREATED组显著增高（P<0.05）;IVSDs中在各时间段BAND与SHAM组比较均无显著性差异，8周与10周中，BANDTREATED组较BAND组有显著性增高（P<0.05），12周中，BANDTREATED组较SHAM组显著增高(P<0.05)；LVPWd在10周中，BANDTREATED组较SHAM与BAND组显著性上升（P<0.05），12周与SHAM组比较中，BAND组与BANDTREATED组均显著上升（P<0.05）；LVPWs中，8周时，与SHAM比较，BAND组显著下降(P<0.05),与BAND比较中，BANDTREATED显著增高（P<0.05）；10周时，BANDTREATED组较BAND组显著增高(P<0.05)，12周时，BANDTREATED组较SHAM组显著增高，与BAND组比较无统计学意义。　　1.4小结　　1.4.1白藜芦醇在一定时间段中抑制压力负荷大鼠心肌细胞肥大。　　1.4.2白藜芦醇减轻压力负荷大鼠左心室腔扩大。　　1.4.3白藜芦醇抑制压力负荷大鼠心室纤维化。　　1.4.5白藜芦醇提高并维持压力负荷大鼠左室收缩功能。　　1.4.6白藜芦醇保护压力负荷大鼠心肌细胞超微结构，不能抑制线粒体肿胀。　　1.4.7白藜芦醇不能抑制压力负荷心功能下降大鼠室壁厚度。　　第二部分：白藜芦醇对钙调控蛋白表达的影响　　2.1研究目的　　研究压力负荷大鼠心肌组织中钙调控调控蛋白在白藜芦醇干预中表达情况，从心肌收缩偶联角度出发，初步探讨白藜芦醇改善压力负荷所致的心脏收缩功能损害、阻止心脏向失代偿阶段演变机制。　　2.2研究方法　　提取各组大鼠各时间段RNA与组织蛋白，采用实时荧光定量（Real-timePCR，qPCR）检测中CaMKII、PLB、NCX1、SERCA2、RYR2的mRNA的表达，用Westernblot检测左室匀浆中CaMKII、p-CaMKII、PLB、p-PLB、NCX1、SERCA2、RYR2中蛋白表达水平。　　2.3研究结果　　2.3.1除8周CaMKII在三组间RNA相对量无统计学差异外；与SHAM组比较，BAND组在8周、10周与12周CaMKII、PLB、NCX1的RNA相对水平均显著增高（P<0.01），SERCA2、RYR2的RNA相对水平显著降低（P<0.01）；与BAND组比较中，各时间段BANDTREATED组CaMKII、PLB、NCX1的RNA相对水平显著下调(P<0.01),而SERCA2、RYR2的RNA水平达显著上调（P<0.01）。（结果如：表1~5）　　2.3.2除了8周CaMKII在三组间无统计学差异，与SHAM组比较，BAND组在8周、10周与12周CaMKII、p-CaMKII、PLB、NCX1蛋白表达显著增高（P<0.01），SERCA2、p-PLB、RYR2蛋白表达显著降低（P<0.01），p-PLB/PLB比值也明显下降（P<0.01）；与BAND组比较，各时间段BANDTREATED组CaMKII、p-CaMKII、PLB、NCX1蛋白表达显著下调(P<0.01),SERCA2、p-PLB、RYR2蛋白表达显著降低（P<0.01）　　2.4小结　　2.4.1压力负荷性大鼠能中钙调相关蛋白表达发生了显著改变，这与收缩偶联障碍引起的功能障碍相一致。　　2.4.2白藜芦醇阻止心脏向失代偿阶段演变，其作用可能与调控心肌细胞中多种钙调节蛋白表达有关。　　【全文结论】　　1.白藜芦醇改善及延缓压力负荷大鼠心衰代偿向失代偿中心脏结构改变。　　2.白藜芦醇提高及维持压力负荷大鼠心脏收缩功能。　　3.白藜芦醇通过调控心肌细胞中多种钙调节蛋白表达，改善压力负荷所致的心脏收缩功能损害，阻止心脏向失代偿阶段演变。