目的在大鼠痴呆模型的基础上,以“中药血清药物化学”理论为指导,对灌胃生脉散的痴呆模型大鼠的血中移行成分进行表征,揭示其病理状态下的入血成分及直接作用物质,为生脉散的药效物质基础研究提供基础数据。方法采用灌胃三氯化铝、腹腔注射D-半乳糖的方法复制痴呆大鼠动物模型,并通过对其的病理学观察以及行为学观察进行模型评价,在此基础上研究生脉散对老年痴呆大鼠的干预作用。进而探讨灌胃生脉散后痴呆大鼠血中移行成分及直接作用物质,从而阐明其主要药效物质基础。结果1.老年痴呆动物模型的建立与评价本实验采用灌胃三氯化铝、腹腔注射D-半乳糖的方法复制痴呆大鼠动物模型。对其进行组织病理学观察发现,模型组大鼠的海马CA3区病变严重、神经细胞脱落、形成疏松区、排列紊乱、可见明显神经元损伤,且较空白组模型组切片可见明显的黄染胞浆、神经元细胞显著减少、结构排列稀疏无规则、平均灰度值显著减少、说明模型组脑内Aβ1-40(老年斑)含量增高；再结合行为学观察发现,在定位航行实验中模型组大鼠逃避潜伏期明显较空白组延长(P<0.01),空间搜索实验中模型组较空白组相比在有效象限、有效区域停留时间明显减少。经过平台次数也明显减少(P<0.05)。2.生脉散对老年痴呆的干预作用病理学指标结果,给药组与模型组相比大鼠大脑皮层神经元锥体细胞形态均有所好转,主要表现为锥体细胞排列有序、胞核明显、着色均匀、接近浅蓝紫色,且神经元的数量明显增多、空泡也大为减少；海马CA3区也病变逐渐变好,主要表现在神经元排列有序、结构清楚规则、数量明显增多、细胞核明显、着色均匀深染,且与模型组相比给药组切片的平均灰度值均明显增高,说明生脉散组Aβ1-40含量减少,生脉散对大鼠脑内A β1-40增多具有一定的抑制作用。行为学观察发现在定位航行实验中各组随着训练时间的延长,到达安全平台的速度加快,且较模型组相比给药组逃避潜伏期出现显著加快趋势,这表明给药组大鼠学习记忆能力有所转变,具有显著性差异(P<0.05)。空间搜索实验中给药组大鼠较模型组在有效象限、有效区域停留次数明显增加,经过平台次数也均增多(P<0.05)。3.基于AD大鼠模型的生脉散药效物质基础研究利用UPLC-Synapt G2-Si采集得到的大鼠血清样本数据进行PCA分析,结合选定离子的MS、MS/MS数据,同时参考生脉散体外化学成分信息’,鉴定了AD模型灌胃生脉散后的12个血中成分,分别为：S型人参皂苷Rh1、R型人参皂苷Rh1、人参皂苷RK3、人参皂苷Rh4、五味子醇甲、戈米辛D、五味子醇乙、五味子酯甲、五味子酯乙、五味子甲素、γ一五味子素及五味子乙素。应用Metabolynx分析AD大鼠口服生脉散后血中移行成分时发现,由五味子醇甲、五味子甲素共同代谢产生了3种代谢产物,分别为M3、戈米辛及M12；由五味子醇乙代谢产生的7种产物,为M1、M2、M4、7,8一顺二羟基一2-去甲基-五味子醇甲、M6、M8及M11；由五味子乙素代谢产生了7种代谢产物,分别为M4、M6、戈米辛、M8、M9、M11及M13；其中五味子醇乙及五味子乙素共同代谢产生的代谢产物为M4、M6、M8及M11。结论本实验在中药血清药物化学方法及理论的指导下,利用UPLC-SynaptG2-Si建立了生脉散干预AD大鼠血液样品的分析方法,应用PCA分析、Metabolynx数据处理技术,初步确定12血中移行成分、13个代谢产物。为其药效物质基础的深入研究打下基础,也为其他方剂体内外成分分析给予了借鉴模式。