胆石六号汤剂治疗胆囊炎的实验研究

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目的:研究胆石六号汤剂的解热、镇痛、抗炎和利胆等药学作用,以及对盐酸林可霉素致豚鼠胆囊炎的治疗作用,初步探讨其治疗胆囊炎机制,以期为其后续研发及临床推广使用提供实验依据。方法:1、采用大鼠皮下注射2,4-二硝基苯酚及干酵母混悬液建立发热模型,研究胆石六号汤剂的解热作用;采用小鼠甩尾实验、甲醛致痛实验研究其镇痛作用;采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀和小鼠皮肤毛细血管通透性实验研究其抗炎作用;采用小鼠肠推进和小鼠胆囊重量实验研究其利胆作用。2、皮下注射盐酸林可霉素建立豚鼠胆囊炎模型,观察胆石六号汤剂对豚鼠体重、胆囊及肝脏指数、肝脏和胆囊病理组织学改变以及血浆白细胞数量、肝功能的影响;3、ELISA测定胆囊炎豚鼠胆汁和血清中TNF-α、COX-2的含量,RT-PCR检测肝脏组织中TNF-α、COX-2、NF-κB基因表达的变化,Western Blotting检测肝脏组织中NF-κB蛋白表达的变化。结果:1、胆石六号汤剂10、20 g/kg剂量组对2,4-二硝基苯酚和干酵母混悬液致大鼠发热有显著的解热作用(P<0.05,0.01);胆石六号汤剂10、20、40 g/kg剂量组不同程度地抑制小鼠甲醛实验第Ⅱ时相反应评分值(P<0.05,P<0.01);40 g/kg的剂量组可以提高小鼠的痛阈值(P<0.05,P<0.01);胆石六号汤剂10、20、40 g/kg剂量组减轻小鼠的耳廓肿胀度,肿胀抑制率分别为17%、32%、38%(P<0.05,P<0.01),抑制小鼠皮肤毛细血管通透性的增加,抑制率分别为19%、23%、32%(P<0.05,P<0.01);胆石六号汤剂20、40g/kg剂量组促进炭末在小肠中移动(P<0.05,P<0.01),10、20、40g/kg剂量组促进胆汁分泌(P<0.01)。2、胆石六号汤剂治疗后豚鼠体重较模型组体重增加((P<0.05,P<0.01)),肝湿重和胆囊湿重减少,病理结果显示豚鼠炎症改善;血浆白细胞以及中性粒细胞数目降低(P<0.05,P<0.01);AST、ALT、ALP、GGT、TBIL、TBA降低(P<0.05,P<0.01),且具有一定的剂量依赖性。3、胆石六号汤剂组与模型组相比,胆汁和血清中的TNF-α、COX-2含量明显降低(P<0.05,P<0.01);肝脏组织TNF-α、COX-2、NF-κB m RNA的表达量减少(P<0.05,P<0.01),NF-κB蛋白在肝脏中表达的降低(P<0.05,P<0.01)。结论:1、胆石六号汤剂具有明显的解热、镇痛、抗炎和利胆作用;2、胆石六号汤剂可以减轻盐酸林可霉素致豚鼠胆囊炎的炎症反应,同时有利胆和保护肝脏的作用。3、胆石六号汤剂治疗胆囊炎机制之一可能是通过抑制NF-κB表达,从而抑制TNF-α、COX-2的产生而实现的。
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