泡状棘球蚴生发细胞细胞周期时相的探究

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泡状棘球蚴病(Alveolar echinococcosis,AE)是由泡状棘球绦虫(Echinococcus multicularis,Em)中绦期幼虫引起的一种人畜共患寄生虫病。该病世界分布广,治愈率低,给人类社会带来了严重的经济负担。泡状棘球蚴病的一大特点就是入侵宿主后,在宿主体内呈肿瘤样生长发育和侵润迁移,这与其生发细胞的自我更新能力以及全能性密切相关。生发细胞是泡球蚴体内唯一能够增殖的细胞,且具有全能性,因此对于生发细胞细胞周期调控的研究具有十分重要的意义。尽管泡球蚴生发细胞的干细胞特性已被证实,但是对其细胞周期及其调控机制的研究尚未展开。本文主要从生发细胞的细胞周期时相入手,对泡球蚴的生长发育作以基础研究。1、泡球蚴生发细胞细胞周期时相的特点。本实验先通过EdU单标确定生发细胞细胞周期的总时长的在48 h内。然后利用EdU-BrdU双标以及EdU-pH3双标等方法更精确地分析生发细胞的细胞周期各个时期所占时长。结果表明,泡球蚴生发细胞细胞周期总时长约为26h,各个时期所占的时间依次为:G1期6.5~9.5 h,S 期 8~10h,G2 期 7~7.5h,M 期 1.6~2h。2、宿主因子对泡球蚴生长发育的影响。通过对泡球蚴以及原头节进行外源宿主因子刺激,然后利用EdU标记在表型上观察细胞增殖状况的变化。发现宿主因子能够通过诱导G0期细胞重新进入增殖状态来促进原头节的发育和生长。综上所述,生发层细胞细胞周期较短,能够进行快速的分裂增殖,且在泡球蚴体内维持数量的稳定。诱导G0期细胞重新进入细胞持续性增殖状态是泡球蚴生长发育的重要特征之一。本文为生发细胞细胞周期时相特点的探究提供了有一个可行的实验方法,也为泡球蚴生发细胞细胞周期调控机制的深入研究提供了理论基础。
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