新型氮氟化合物的抗菌作用及其在伤口敷料上的应用研究

来源 :东华大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sswei1988
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继上个世纪30年代青霉素被发现后,大量抗生素和抗菌剂被研究人员成功发明并广泛应用。然而,随着广谱抗生素的滥用,细菌的耐药性日益严重。细菌的耐药性或与菌株的内在特性有关,或由药物诱导下发生基因突变或基因转移引起的。随着微生物的耐药性不断进化和突变,研究人员亟待研发出高效、低毒的抗菌剂,以应对日益严重的细菌和真菌感染。
  我们在之前的工作中,首次设计出一种新型氯化试剂N-氯-N-氟苯磺酰胺(CFBSA),该化合物具有结构简单、反应活性高、价廉易得、底物范围宽、贮存稳定性好等特点,具有潜在的抗菌活性。CFBSA是以氯胺B为原料,经一步反应生成的。不同于氯胺B,CFBSA在分子上具有N-F键,这可能有助于提高抗菌活性和降低细胞毒性。
  本研究中,我们对CFBSA对于不同菌株的抗菌活性、细胞毒性以及作用机理进行探讨。首先通过κ-B纸片扩散实验检验氮氟化合物以及阳性对照药物对于不同菌株的抑菌效果并计算抑菌率,初步分析氮氟化合物的抗菌活性;然后又通过微量液基稀释法检测不同氮氟化合物以及阳性对照药物对于不同菌株的最小抑菌浓度(MIC80),进一步确定氮氟化合物抑菌浓度范围,并与阳性对照药物进行比较;接着通过结合微量液基稀释法和涂板法对不同氮氟化合物以及阳性对照药物最低杀菌浓度(MBC)进行检测,分析与比较药物的杀菌效果。与常用抗菌药物(磺胺嘧啶、氟康唑)比较,CFBSA表现出更好的抗菌效果。经过体外细胞毒性检测,发现CFBSA细胞毒性低,IC为514.3±33.6μg/mL。接下来我们又对该新型化合物的抗菌机制进行了初步探讨,通过形态学观察和检测细菌和真菌细胞对CFBSA氧化应激水平,发现CFBSA主要作用于细菌和真菌的细胞膜,并会对细菌/真菌造成氧化损伤而达到杀菌的效果。
  鉴于CFBSA良好的杀菌效果,采用共混纺丝技术将CFBSA负载在P(LLA-CL)/SF纳米纤维膜上,制备了一种抗菌敷料。TEM图像显示CFBSA在P(LLA-CL)/SF纤维中均匀分布,并且能保持稳定。不同浓度的CFBSA负载的P(LLA-CL)/SF纳米纤维表现出不同的直径分布;载药纳米纤维膜的水接触角随CFBSA含量的增加而变化,少量的CFBSA会增加载药纳米纤维膜的亲水性,而当CFBSA在纺丝液中的比例足够高时,负载CFBSA的纳米纤维膜(SP-10)表现出疏水性。体外抗菌实验结果表明,所有CFBSA负载的P(LLA-CL)/SF纤维膜均具有良好的抗菌活性,载药纳米纤维膜SP-2.5、SP-5、SP-10对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和白色念珠菌均有显著的抗菌作用。CFBSA负载的P(LLA-CL)/SF纳米纤维膜在纺丝液中的比例不超过2.5%(v/v)时,对L929细胞无明显细胞毒性。基于生物相容性和抗菌效果,在进一步应用CFBSA负载P(LLA-CL)/SF用于抗菌敷料时,可选择SP-2.5作为理想的负载浓度。
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