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目的:绝大多数的侵袭性子宫颈癌与HPV感染相关,其中E6/HPV 16+基因在子宫颈癌细胞活性、迁移和增殖中起到重要作用,本研究以eIF5A-1基因为切入点,旨在研究eIF5A-1基因是否参与了E6/HPV 16+基因诱发子宫颈癌细胞的增殖和迁移等一系列生物学反应,以期探寻子宫颈癌发生发展的分子机制,并为子宫颈癌临床治疗寻找潜在的新型靶点和理论依据。方法:收集子宫颈癌组织及癌旁正常子宫颈组织各40例,采用Western blot检测E6/HPV 16+蛋白和e IF5A-1蛋白的表达水平;将构建的重组质粒E6/HPV 16+质粒、E6/HPV 16+siRNA质粒、重组质粒eIF5A-1和eIF5A-1 siRN A质粒分别转染人子宫颈癌SiHa细胞株,或施加特异性抑制剂环吡咯(CPX)作用,采用Real time PCR及Western blot检测E6/HPV 16+蛋白和eIF5A-1基因的表达水平;免疫组化对E6/HPV16+和eIF5A-1蛋白的表达进行定位检测;采用流式细胞计数对子宫颈癌细胞凋亡率进行评估;甲基噻唑基四唑(MTT)对子宫颈癌细胞的活性进行检测;Transwell实验对子宫颈癌细胞迁移能力进行评估;采用~3H-胸腺嘧啶核苷酸参入量(~3H-TdR)法评估子宫颈癌细胞的增殖能力,以此检测子宫颈癌细胞活性、迁移、增殖和凋亡等一系列生物学反应。结果:对子宫颈组织中E6/HPV 16+蛋白表达水平进行检测,结果显示:E6/HPV16+蛋白表达在34例(85.0%)子宫颈癌组织中显著上调,而癌旁组织中仅2例(5%)表达上调,且E6/HPV 16+蛋白主要定位于细胞质中;沉默E6/HPV 16+基因,SiHa细胞增殖和迁移能力显著下降,与阴性siRNA组比较具有统计学意义(p<0.01),过表达E6/HPV 16+基因SiHa细胞增殖活性明显升高,具有统计学差异(p<0.01);SiHa细胞凋亡在转染E6/HPV 16+siRNA质粒显著增多,差异具有统计学意义(p<0.01);与空载体质粒组比较,转染E6/HPV 16+载体质粒,SiHa细胞的凋亡数量显著减少,其具有统计学差异(p<0.01)。采用Real-time PCR、免疫印迹及免疫组化对子宫颈组织中eIF5A-1蛋白表达进行检测,实验结果显示,e IF5A-1基因在子宫颈鳞癌组织中显著高表达,且eIF5A-1蛋白主要定位于细胞质中;Real-time PCR和免疫印迹结果显示,E6/HPV 16+基因可诱导e IF5A-1基因表达;对子宫颈癌细胞的活性、迁移和增殖检测结果显示,与阴性siRNA组比较,转染e IF5A-1 siRNA质粒,SiHa细胞的活性、迁移和增殖能力显著下降,差异具有统计学意义(p<0.05);与空载体质粒组比较,转染eIF5A-1载体质粒,SiHa细胞的活性、迁移和增殖能力明显升高,具有显著的统计学差异(p<0.01);而CPX的药物通过阻止eIF5A-1成熟,使子宫颈癌细胞活力、迁移和细胞增殖都有所下降,差异具有统计学意义(p<0.05);沉默eIF5A-1基因或CPX处理的细胞导致凋亡的细胞是单独E6/HPV 16+组的3.13和3.05倍(p>0.01);同期检测发现子宫颈癌细胞质出现很多空泡,细胞核边缘化,部分细胞核染色质聚集、增多,并呈现边缘化,细胞内凋亡小体形成;且子宫颈癌细胞的活力、迁移和增殖能力显著下降,差异具有显著的统计学意义(p<0.01)。结论:E6/HPV 16+基因在子宫颈癌细胞致瘤转化中发挥重要作用。e IF5A-1基因沉默或阻断hypusine酶活性,有效抑制E6/HPV 16+诱导的子宫颈癌细胞的活性、迁移和增殖,因此,eIF5A-1基因在E6/HPV 16+诱发的子宫颈细胞癌变中发挥着关键的调控作用,可以成为子宫颈癌治疗的潜在干预靶点。