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目的通过对控制性超排卵周期(controlled ovarian hyperstimulation,COH)中多囊卵巢综合征(PCOS)患者卵丘颗粒细胞生长分化因子-9(GDF-9)、骨形成蛋白-15(BMP-15)及凋亡相关因子BCL-2、BAX表达检测,初步探讨PCOS患者GDF-9、BMP-15表达异常对卵丘颗粒细胞凋亡调控机制和对卵母细胞质量的影响,为改善PCOS患者辅助生殖助孕结局提供新的思路。方法选择2015年1月至2016年7月在福建省妇幼保健院辅助生殖技术研究室因男方少弱精子症行卵胞浆单精子注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)治疗的PCOS患者30例和对照组60例,收集卵丘颗粒细胞。采用免疫组化方法检测卵丘颗粒细胞GDF-9、BMP-15蛋白的定位表达,运用Motic Med 6.0数码医学图像分析系统(厦门麦克奥迪)对染色强度定量分析;采用Real-time PCR技术检测卵丘颗粒细胞GDF-9、BMP-15、BCL-2、BAX mRNA表达;通过流式细胞术和TUNEL法检测卵丘颗粒细胞凋亡情况。选择相应的统计学方法分析数据:两组间计量资料和计数资料比较分别用t检验和χ2检验,变量间相关性用Pearson相关分析。结果1、对照组和PCOS组患者的年龄、不孕年限、体重指数(BMI)、基础血清FSH、E2、PRL差异无统计学意义(P>0.05);PCOS组基础LH、T显著高于对照组(P<0.05),在经过达英-35及二甲双胍预处理后,COH周期PCOS组血清FSH、PRL、E2、LH、T水平与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。PCOS组穿卵泡数、获卵数、成熟卵子数、受精数较对照组升高,而优质胚胎率、优质囊胚率较对照组均降低(P<0.05)。2、卵丘颗粒细胞GDF-9、BMP-15免疫组化表达结果显示,GDF-9、BMP-15在对照组和PCOS组卵丘颗粒细胞胞浆中呈阳性表达,采用Motic Med 6.0数码医学图像分析系统对免疫组化染色强度定量分析,结果提示PCOS组卵丘颗粒细胞GDF-9、BMP-15表达低于对照组(P<0.05)。3、采用Real-time PCR技术检测卵丘颗粒细胞GDF-9、BMP-15表达,结果显示PCOS组卵丘颗粒细胞GDF-9、BMP-15表达低于对照组(P<0.05)。4、通过TUNNEL法和流式细胞术(AnnexinV-PI双染法)对对照组和PCOS组卵丘颗粒细胞凋亡率检测,结果显示PCOS组卵丘颗粒细胞凋亡率较对照组显著升高(P<0.05)。采用Real-time PCR技术检测凋亡相关因子BCL-2、BAXmRNA的表达,发现PCOS组卵丘颗粒细胞BCL-2、BAX mRNA表达均较对照组显著下降,但BAX/BCL-2比值显著上升(P<0.05)。5、通过Pearson相关分析,结果显示卵丘颗粒细胞GDF-9、BMP-15 mRNA表达与受精率、卵裂率及优质胚胎率呈正相关;在PCOS组中卵丘颗粒细胞GDF-9、BMP-15 mRNA表达与BCL-2 mRNA呈正相关,与BAX mRNA呈负相关。结论研究结果提示,PCOS患者受精率、卵裂率、优胚率及优质囊胚率较正常对照组显著降低,卵丘颗粒细胞凋亡率显著上升,提示PCOS患者卵母细胞质量下降。PCOS组卵丘颗粒细胞GDF-9、BMP-15表达较正常对照组显著下降,PCOS组GDF-9、BMP-15 mRNA表达与抗凋亡因子BCL-2呈正相关,与凋亡相关因子BAX mRNA呈负相关。因此,我们认为PCOS患者卵巢卵丘颗粒细胞GDF-9、BMP-15mRNA表达下降,引起凋亡相关因子BCL-2、BAX mRNA表达异常,进而导致卵丘颗粒细胞凋亡增加,这可能是PCOS患者卵母细胞质量下降的原因。