氢过氧化物裂解酶合成己醛反应和合成己烯醛反应的研究

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己醛、己烯醛等芳香醛类物质是构成绿色植物特有清香的主要成分,它们在植物体内主要是通过脂肪氧合酶(LOX)/氢过氧化物裂解酶(HPL)途径合成的。它们具有果蔬所特有的清香,可广泛应用于食品工业及化妆品工业。本文以亚油酸乙酯和亚麻酸乙酯为原料,先经皂化生成亚油酸和亚麻酸,再经LOX催化生成亚油酸氢过氧化物和亚麻酸氢过氧化物,以苋菜作为HPL的酶源,对HPL裂解这两种脂肪酸氢过氧化物分别合成己醛和己烯醛的反应进行了研究。氢过氧化物裂解酶粗酶对芳香醛类具有的吸附作用会影响产物测定的准确度。本文在校正此误差的基础上,通过单因素实验初步确定了反应时间、pH、温度、底物浓度、加酶量、BHT浓度、DTT浓度对己醛和己烯醛产量的影响情况;在此基础上对于合成己醛反应和合成己烯醛反应的底物浓度,加酶量,pH等因素进行正交实验。合成己醛反应的最佳反应条件为:反应时间20 min、pH 7.5、温度20℃、亚油酸氢过氧化物(13-HPOD)浓度35 mmol/L、酶底比3/35、BHT浓度0.5 mmol/L、DTT浓度15 mmol/L。在最佳反应条件下,己醛产量为2425 mg/L。合成己烯醛反应的最佳反应条件为:反应时间10 min、pH 8.0、温度20℃、亚麻酸氢过氧化物(13-HPOT)浓度40 mmol/L、酶底比3/10、BHT浓度1 mmol/L、DTT浓度15 mmol/L。在最佳反应条件下,己烯醛产量为1220 mg/L。本论文还对半连续法生产己醛和己烯醛进行了研究,分批加底物有利于进一步提高醛类的产量。在分批加底物的条件下,己醛产量为2450 mg/L,己烯醛产量为1247 mg/L。通过GC-MS对HPL反应的挥发性产物进行鉴定。经水蒸汽蒸馏得到己醛和己烯醛的浓缩液,得率分别为86.9 %和9.9 %。
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