酒精对胚胎转运的影响及机制

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背景介绍输卵管妊娠是异位妊娠的一种,虽然其发生的根本原因仍然未知,但是胚胎滞留在输卵管中是导致输卵管妊娠发生的一个重要因素。现代医学研究证实,妇科炎症、结扎手术史和人工流产史,都会引起输卵管管腔堵塞,从而引起输卵妊娠。而且吸烟、服用药物和一些不良的生活习惯等均可导致输卵管妊娠的发生。酒精时常被人们作为一种饮品,然而研究证明过度饮酒不仅会导致心血管系统疾病、肝脏疾病和精神类疾病,而且酒精还和女性的许多生殖系统疾病有关。妊娠期饮酒对子代发育的影响已经成为现代研究的热点,然而,饮酒与胚胎在输卵管中的转运和胚胎早期发育之间的关系还没有被证实。本实验将探究在妊娠早期酒精对胚胎在输卵管中转运的影响及其机制,探究酒精与输卵管妊娠之间是否存在些许因果关系。材料与方法人体输卵管均取自临床具有生育能力的患者,患者分别接受了异位妊娠手术、子宫切除术和产后节育手术等。BABL/c小鼠和Wistar大鼠均购买自山东大学医学院动物中心。在急、慢性酒精摄入实验中,BABL/c小鼠经灌胃注射不同药物,分别持续3天和30天。研究中采用离体肌条张力实验检测输卵管平滑肌运动变化;Wstern blot蛋白印迹分析一氧化氮合酶(NOS)表达;BABL/c小鼠子宫和输卵管胚胎计数实验;HE染色法(hematoxylin-eosin staining,苏木素-伊红染色法)检测小鼠输卵管腹壶部和峡部形态;硝酸还原酶法测定输卵管中一氧化氮(NO)的含量;扫描电子显微镜(SEM)检测小鼠输卵管壶腹部和峡部的形态。实验结果本课题,输卵管肌条张力实验结果显示,酒精具有抑制人离体输卵管平滑肌的自发性收缩的作用,而且这种抑制具有浓度依赖性。而加入L-NAME(一种经典的一氧化氮合酶NOS的竞争性抑制剂)可以缓解酒精的这种抑制作用。人、Wistar大鼠和BABL/c小鼠输卵管组织Wstern blot蛋白印迹分析一氧化氮合酶(NOS)活性实验证明酒精可以诱导输卵管组织中一氧化氮合酶(NOS)表达上调,而加入L-NAME可以降低一氧化氮合酶(NOS)的表达。硝酸还原酶法实验结果证明,酒精可以使输卵管组织一氧化氮(NO)释放增多,而加入L-NAME可以降低酒精诱导的输卵管组织一氧化氮(NO)的释放量。在胚胎计数实验中发现,急、慢性酒精摄入都会引起胚胎滞留在小鼠输卵管中,值得注意的是,L-NAME只能可以减缓急性酒精摄入引起的胚胎滞留。在慢性酒精摄入实验中,苏木精一伊红染色法和扫描电子显微镜(SEM)检测小鼠输卵管的切片,发现慢性酒精摄入会导致小鼠输卵管上皮细胞损伤、脱落。这提示我们急、慢性酒精摄入阻碍小鼠胚胎转运的机制不完全相同。结论我们本课题实验结果证实,酒精会导致输卵管中的NO释放增多,并且通过NO信号途径抑制输卵管平滑肌的收缩;长期摄入酒精还会损伤输卵管的形态结构。急、慢性酒精摄入均会导致小鼠输卵管中的胚胎滞留。这提示我们酗酒可能会导致输卵管妊娠。
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