【摘 要】
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目的探讨长链非编码RNA（Long noncoding RNA,Lnc RNA）LINC00978对甲状腺乳头状癌增殖和侵袭的影响及其可能发生的机制。方法1选用甲状腺乳头状癌TPC-1细胞系进行研究,规范培养至对数生长期时,转染不同浓度梯度荧光标记的si RNA-CY3,转染6h后观察转染效率,明确最佳转染基因浓度;2 q RT-PCR检测干扰LINC00978细胞构建是否成功;3细胞计数试剂盒-
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目的探讨长链非编码RNA（Long noncoding RNA,Lnc RNA）LINC00978对甲状腺乳头状癌增殖和侵袭的影响及其可能发生的机制。方法1选用甲状腺乳头状癌TPC-1细胞系进行研究,规范培养至对数生长期时,转染不同浓度梯度荧光标记的si RNA-CY3,转染6h后观察转染效率,明确最佳转染基因浓度;2 q RT-PCR检测干扰LINC00978细胞构建是否成功;3细胞计数试剂盒-8（CCK-8）法用来检测细胞增殖能力,通过观察各组在450nm处的吸光度,分别在转染后24h、48h、72h、96h进行检测;4划痕愈合实验用来检测细胞迁移能力,通过比较各组在相同时间内的细胞迁移面积的变化,观察指标是48h细胞迁移率;5 Transwell实验用来检测细胞侵袭能力,通过观察各组在相同时间内穿到小室背面的细胞数,观察指标是侵袭细胞数目;6 Western blot技术检测信号通路相关蛋白表达量。结果1 Lipofectamine2000可成功将si RNA-CY3转染至细胞内,当基因浓度为50n M时转染效果最佳,转染效率可达60%以上。2 q RT-PCR的结果表明:3个抑制基因都可以成功抑制LINC00978（P＜0.01）将转染si-LINC00978-3、si-NC、PBS分别作为转染组、对照组、空白组。3 CCK-8实验结果表明:相较于对照组及空白组,转染组在转染24h、48h、72h、96h的细胞增殖能力显著降低,差异有统计学意义（P＜0.01）。4划痕愈合实验表明:转染组48h的细胞迁移率明显较其他两组低（P＜0.01）。5 Transwell侵袭实验结果示:相较于对照组及空白组,转染组的侵袭能力减弱（P＜0.01）。6 Western blot结果显示:转染组P-ERK1/2蛋白的表达量较其他两组降低,各组间ERK1/2蛋白的表达量无明显差异。结论Lnc RNA LINC00978可促进甲状腺乳头状癌的增殖、迁移及侵袭,其机制可能跟调控MAPK信号通路中关键分子ERK1/2的磷酸化有关。图 11 幅;表 10 个;参 123 篇。
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