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目的：利用RNA干扰(RNAi)技术抑制肝癌细胞IFG-Ⅱ基因的过表达，验证前期工作中筛选的肝癌细胞IGF-Ⅱ的RNA干扰有效靶点；抑制肝癌细胞增殖，明确IGF-Ⅱ表达与肝癌细胞凋亡的关系，为肝癌的基因治疗提供依据。方法：本实验通过脂质体将靶向IGF-ⅡmRNA序列不同位点设计合成的三条40nM siRNA分别转入肝癌细胞株SMMC-7721、SMMC-7402、HepG-2，并行FAM荧光标记，同时设立一个无任何靶基因的siRNA作为阴性对照(siRNA4)。以siRNA4、空白对照及转染空脂质体细胞为对照。荧光显微镜下观察siRNA的转染效率；RT-PCR检测转染siRNA肝癌细胞HepG-2的IGF-ⅡmRNA表达水平，筛选有效干扰序列。将筛选的有效siRNA分别转入SMMC-7721、SMMC-7402、HepG-2肝癌细胞株，以siRNA4、空白对照、单纯siRNA(未转染)组细胞及转染空脂质体细胞为对照，48小时后，分别以流式细胞仪检测三株转染肝癌细胞生长周期及凋亡率的改变；用透视电镜观察肝癌细胞凋亡的形态学特征。结果：利用FAM荧光标记观察到siRNA转染效率可达65～80％。半定量RT-PCR结果表明，40nM siRNA1～3对肝癌细胞HepG-2的IGF-Ⅱ表达，均有不同程度抑制作用，其中siRNA3抑制率最高，可达87.02％，无任何靶基因的siRNA4仅2.56％。因此筛选出最有效siRNA序列为siRNA3，其正义链序列为：5′-GUUCUUCCAAUAUGACACC-3′，反义链序列为：5′-GGUGUCAUAUUGGAAGAAC-3′。RNAi沉默IGF-Ⅱ后，透视电镜可见转染组细胞呈现凋亡的形态特征；流式细胞仪证实沉默IGF-Ⅱ能改变肝癌细胞的细胞周期，阻滞在G1期并诱导肝癌细胞凋亡。结论：设计合成靶向IGF-ⅡmRNA序列的siRNA，采用化学合成及脂质体转染肝癌细胞株SMMC-7721、SMMC-7402、HepG-2，有较高的转染效率，验证前期工作筛选出一条siRNA序列是抑制肝癌细胞IGF-Ⅱ过表达的RNA干扰有效靶点。它可以有效地抑制肝癌细胞增殖，诱导其凋亡；提示过表达IGF-Ⅱ在肝癌细胞凋亡的重要整合和调控作用，补充和完善IGF-Ⅱ在肝癌细胞凋亡的界面机制。为深入探讨肝癌的基因治疗提供了新的方法与途径。